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[目 的]比较单个宿主基因甲基化、宿主基因甲基化组合、HPVE6/E7 mRNA及后两者与TCT联合在不同等级宫颈病变中表现的差异,探讨不同检测方式对Hr-HPV阳性人群的风险预测效能和分流效果,同时对比分析宫颈活检与宫颈锥切病理结果,并随访Hr-HPV及TCT情况,为宫颈疾病的分流管理提供依据。[方 法]在2019年12月至2020年12月于昆明市延安医院妇科就诊的6万余人中,根据纳入排除标准,筛选出100例Hr-HPV持续阳性人群作为研究对象,将100例研究对象分为两组,50例采集宫颈细胞学标本进行宿主基因甲基化检测,另外50例采集宫颈细胞学标本进行HPV E6/E7 mRNA检测,采集患者年龄、生育情况、怀孕次数、分娩次数、绝经情况和感染Hr-HPV型别、HPV DNA分型检测、TCT、宫颈活检及锥切组织病理结果等临床资料,并对人群进行12个月的随访。运用统计学方法比较单个宿主基因甲基化、宿主基因甲基化组合、HPV E6/E7 mRNA及后两者与TCT联合在不同宫颈病变级别、不同年龄组、不同Hr-HPV感染类型中表现的差异,同时分析宫颈疾病的转归情况。[结 果]1.单个宿主基因甲基化、宿主基因甲基化组合及HPV E6/E7 mRNA检测阳性表达均与年龄、生育状态、怀孕次数、分娩次数、避孕方式及绝经状态无关。2.除DLX1外,单个宿主基因甲基化率、宿主基因甲基化组合阳性率及HPV E6/E7 mRNA阳性率随宫颈病理等级的增加而呈上升趋势（Ptrend＜0.05）;RXFP3基因、ZNF671基因及6个宿主基因甲基化组合在HPV16/18组中阳性率较非HPV16/18组中高,差异具有统计学意义,其余基因甲基化阳性表达与Hr-HPV型别无关;HPV E6/E7 mRNA检测阳性率与Hr-HPV感染类型及年龄无明显关联。3.宿主基因甲基化组合在CIN3+的得分中位数显著高于CIN2及≤CIN1,若一样本检测得分为0分,诊断倾向于≤CIN1,若得分＞0.7及以上（得分为小数点后1位）,诊断倾向于CIN3+。4.风险预测能力:①就单一检测而言,ZNF671基因甲基化阳性者发生CIN2+、CIN3+的风险最高,aOR 分别为 34.636（95%CI:2.464,486.895）和 8.295（95%CI:1.478,46.549）;②联合检测结果阳性者较单一检测阳性者发生CIN2+、CIN3+的风险更高,其中宿主基因甲基化组合联合TCT阳性者发生CIN2+、CIN3+的风险最高,aOR 分别为 37.151（95%CI:3.268,422.367）和 15.058（95%CI:2.528,89.699）;③HPVE6/E7 mRNA 阳性者较阴性者发生CIN2+、CIN3+的风险高。5.对CIN2/3检出率:HPV E6/E7 mRNA无论是否与TCT联合,对CIN2+、CIN3+的检出率最高,联合检测对CIN2+、CIN3+的检出率分别为92.9%（13/14）和85.7%（6/7）,单独检测对CIN2+、CIN3+的检出率分别为85.7%（12/14）和85.7%（6/7）。6.分流能力:①在单个基因检测中,以CIN2+或CIN3+作为研究终点,发现ITGA4和RXFP3基因甲基化检测检出疾病的敏感度在20%-50%之间,特异度在90%以上,DLX1基因敏感度在54%-60%之间,特异度在46-48%之间,ASTN1和SOX17基因的敏感度在29%-60%之间,特异度在76%-85%之间,ZNF671的敏感度在41%-60%之间,特异度在85%以上;②在单一检测中,宿主基因甲基化组合及ZNF671基因甲基化的分流效果最佳,检出CIN2+的敏感度分别为41.7%和41.7%,特异度分别为88.5%和92.3%,PPV分别为77.0%和83.3%,NPV分别为62.2%和63.2%,检出CIN3+的敏感度分别为60.0%和60.0%,特异度分别为82.5%和85.0%,PPV分别为46.2%和50.0%,NPV分别为89.2%和89.5%;③多个基因联合检测中,ZNF671与RXFP3基因联合检测的分流效能最佳,CIN3+的敏感度为70.0%,特异度为80.0%,PPV为46.7%,NPV为91.4%,以CIN2+为研究终点,结果类似;④在与TCT联合检测中,宿主基因甲基化组合联合TCT分流效能最佳,检出CIN2+敏感度为54.2%,特异度为88.5%,以CIN3+为研究终点,结果类似;⑤HPV E6/E7 mRNA无论是否与TCT联合均具有较高的敏感度及阴性预测值,但特异度及阳性预测值仍较低,联合TCT检测对诊断CIN2+的敏感度为92.9%,特异度为41.7%,NPV为38.2%,PPV为93.8%,以CIN3+为研究终点,结果类似。7.随访结果:①行锥切术的30例CIN2/CIN3术后12个月行HPV DNA分型、TCT及阴道镜下活检复查宫颈病变转归情况,结果提示宿主基因甲基化组合阳性者较阴性者,宫颈病变消退率低（50.0%vs 90.0%）,病变进展率高（16.7%vs 0.0%）;HPVE6/E7 mRNA阳性者较阴性者,宫颈病变消退率低（75.0%vs 100.0%）,病变进展率高（8.3%vs 0.0%）②选择随访观察的26例≤CIN1中,Hr-HPV未转阴女性的年龄比转阴女性的年龄大（53.45±11.75 vs46.43±12.55,44.50±12.29vs 41.46±12.46）、HPV16/18 感染率高（63.6%vs 35.7%,60.0%vs33.3%）、宿主基因甲基化阳性率高（27.3%vs 0.0%）及HPVE6/E7 mRNA阳性率高（80.0%vs 60.0%）。[结 论]1.除DLX1外,单个宿主基因甲基化率、6个宿主基因化组合的阳性率及HPV E6/E7 mRNA检测的阳性率随宫颈病变等级的增加而呈上升趋势。2.在Hr-HPV持续阳性人群中,HPV E6/E7 mRNA对高级别宫颈病变的风险预测效能低于宿主基因甲基化组合检测,对高级别宫颈病变的检出率及敏感度较高,但特异度较低。3.单独使用ZNF671基因及宿主基因甲基化组合对Hr-HPV阳性人群的分流效能及风险预测效能相当,它们的敏感度、特异度及风险预测值保持在较高水平,能减少一过性Hr-HPV感染造成的假阳性结果,从而避免一过性Hr-HPV感染女性的过度治疗;ZNF671基因检测较宿主基因甲基化组合检测经济简便,宿主基因甲基化组合的优点在与其评分大小与病变等级严重程度相关。4.联合TCT检测较单一检测对Hr-HPV阳性人群的风险预测效能及分流效能较好,其中宿主基因甲基化组合联合TCT效能更好。5.宿主基因甲基化及HPVE6/E7 mRNA检测为Hr-HPV持续感染人群的分流管理提供了新的思路,在今后需扩大样本深入研究。