益气解毒方对鼻咽癌CNE2细胞周期与肿瘤干细胞标志物CD44、ABCG2表达的影响

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[目的]观察益气解毒方干预人鼻咽癌CNE2细胞增殖活性的细胞周期效应特点及其与肿瘤干细胞标志物CD44、ABCG2表达活性的相关性。[方法]1.制备益气解毒方大鼠药物血浆,实验确定药物血浆的IC50浓度,MTT比色法检测益气解毒方对CNE2细胞增殖活性的影响效率。2.将最佳效应浓度药物血浆作用于体外培养的CNE2细胞,用流式细胞术分析益气解毒方对CNE2细胞周期的效应特点。3.制备CNE2细胞爬片,予以益气解毒方药物血浆干预,免疫组化法检测干细胞标志物CD44、ABCG2勺表达活性特点,分析其与益气解毒方药物血浆干预效应的相关性。[结果]1.药物血浆组、药物血清组、顺铂组与空白组比较,P<0.01,差异有显著性统计学意义;与顺铂组比较,10%药物血浆组无明显差异,P>0.05,其余各组均显示统计学意义,P<0.05;随着药物血浆及药物血清浓度的增加,细胞的存活率逐渐变小,呈现浓度依耐性特点。同等浓度的药物血浆组细胞存活率均比药物血清组低,但在1%浓度时,无明显统计学意义,P>0.05。2.益气解毒方药物血浆干预CNE2细胞48h后,随着药物浓度的增加,其GO/G1期细胞比例逐渐增加,与空白对照组相比,P<0.01,呈现浓度依赖性特点,统计学意义显著;S期细胞比例逐渐减少,与空白对照组相比,P<0.01,同样呈现浓度依赖性特点,统计学意义显著;G2/M期细胞比例有所降低,但与空白组相比,P>0.05,无统计学意义。3.HaCaT组、CNE2组、药物血浆组细胞爬片中,CD44阳性细胞比例分别为0%、41.67%、25.00%,ABCG2阳性细胞比例分别为2.13%、44.60%、32.78%。各组之间比较,P<0.01,有显著性统计学意义。[结论]1.益气解毒方对鼻咽癌CNE2细胞的增殖活性有明显抑制作用,并呈现量效和时效相关性特点。2.益气解毒方对鼻咽癌CNE2细胞增殖活性的干预效应具有明显的细胞周期特异性作用特点,表现为GO/G1期阻滞,促进其加速进入细胞凋亡程序。3.益气解毒方对鼻咽癌CNE2细胞肿瘤干细胞标志物CD44和ABCG2勺表达活性显示了较强的干预效应,可能通过对鼻咽癌肿瘤干细胞的抑制效应而使得CNE2细胞阻滞于GO/G1期,促进细胞凋亡活性,进而干预了其增殖活性。
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