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一氧化氮(NO)最初是由Furchgott教授于20世纪80年代初以内皮衍生舒张因子(EDRF)的形式提出的,近年来发现它在疼痛的形成中发挥着重要的作用。脊髓背角浅层(即Ⅰ~Ⅲ层)是痛觉传递中的一个重要结构,中央管周围灰质(即X层)的功能至今尚不清楚,因此研究脊髓中央管周围灰质及背角浅层NOS(一氧化氮合酶)阳性神经元,分析其在针刺镇痛中的作用机制具有一定的意义。本文采用NADPH-d法,比较系统地观察了在正常情况下,疼痛刺激条件下,电针刺激条件下,疼痛加电针刺激条件下,一氧化氮合酶阳性神经元(NOS-positiveneurons)在腰骶段脊髓中央管周围灰质及背角浅层的分布及数目多少变化,以分析脊髓中央管周围灰质及背角浅层NOS阳性神经元与针刺镇痛的关系。 实验用健康成年wistar大鼠20只,体重250~300g,分4组:1.正常组,2.疼痛刺激组:以大鼠右侧后脚掌注射5%甲醛200μl作为疼痛模型;3.电针刺激组:动物固定后,用针 郑州大学医学院研究生毕业论文 腰骰段脊髓中央管周围灰质及背角浅层NOS阳性神经元与针刺镇痛机制分析 灸治疗仪刺激其右侧后肢“足三里”穴门\趾k,持续0.5): 4.疼痛刺激加电针刺激组,在大鼠右侧后脚掌注射5%甲醛 200ill后立即固定,并用针灸治疗仪刺激同侧后肢“足三里”穴 3V5 SHz,持续 0.sh人 上述四组动物均于半小时后处死,常 规灌注冰冻切片(片厚40仰人进行NADPHd反应。所得结 果用日本OlympllS的高倍显微镜进行计数和统计,测得在以上 四种情况下脊髓腰骰段中央管周围灰质及背角浅层一氧化氮合 酶阳性神经元的数目。每只动物中央管周围灰质NOS阳性神经 元数为该动物20张切片中央管周围灰质阳性神经元计数的乎均 值,每只动物背角浅层NOS阳性神经元数为该动物20张刺激 侧背角浅层门叶层邓性神经元计数的平均值,每组动物 NOS 阳性神经元数为该组动物NOS阳性神经元计数的平均值。结果 以均数土标准差kh)表示。结果如下: 一、正常情况下,有少量NOS阳性神经元分布在中央管周 围灰质(2.91士0.83)及背角浅层(2*6土1*3)。 二、疼痛刺激后,背角浅层o.97*.40)及中央管周围灰质 (8.刊士1*2)NOS 阳性细胞较正常组均明显增多(P<0刀1)。 三、单纯电针刺激后,背角浅层p刀1切.86)及中央管周围 灰质O.刀功石5)*OS阳性细胞较正常组均无明显变化什卜0.OS) 四、疼痛刺激加电针刺激后,背角浅层C.20川刀幻及中央 管周围灰质p.87士0.88)**S阳性细胞较正常组均无明显变化 (P>刀5h而与疼痛刺激组相比,上述两区域NOS阳性细胞均 明显减少?功.01卜 2 郑州大学医学院研究生毕业论文 腰骰段脊髓中央管周围灰质及背角饯层NOS阳性神经元与针刺镇痛机制分析 以上结果表明: 1.正常情况下,少量NOS阳性细胞集中在中央管周围灰 质及背角浅层。 2.疼痛刺激可激活固有型NOS,引起脊髓背角浅层及中央 管周围灰质NOS阳性细胞数目明显增加。同时发现中央管周围 灰质可能与痛觉传递有关,为疼痛方面的研究提供了形态学基 础。 3.单纯电针刺激未能使C纤维兴奋从而激活固有型NOS, 因此与正常组相比上述两区域NOS阳性细胞数目无显著变化。 4.疼痛刺激加电针刺激后,由于电针刺激通过内源性阿片 系统发挥了镇痛作用,因此上述两区域NOS阳性细胞数又恢复 到正常水平。