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多药耐药(Multidrug resistance,MDR)是肿瘤化疗成功的主要障碍,突破肿瘤多药耐药是肿瘤治疗面临的一大挑战。目前单一的化疗药物或治疗手段突破肿瘤耐药的效果并不理想,因此运用多种类型化疗药物或治疗手段的联合治疗来突破肿瘤耐药引起关注。纳米技术相比传统药物具有许多优势如改善药物释放、通过增强渗透与滞留效应(enhanced permeatin and retention,EPR)增加肿瘤组织富集、可控修饰、以及多种药物或多种治疗手段的协同作用等,增加肿瘤治疗效果,降低毒副反应。因此本课题探索新型协同作用的纳米药物用于克服肿瘤的耐药,我们分别设计了具有高载药量的表面活性素(Surfactin,SUR)载药纳米粒DOX@SUR以及pH和光热双重响应的智能金纳米笼(Gold nanocages,GNCs)纳米药物DOX@pPGNCs,实现多种化疗药物或化疗与光热作用的协同治疗。主要研究内容及结果如下:(1)DOX@SUR纳米粒的制备及特性研究。通过控制投料比制备具有高载药量和合适粒径的DOX@SUR纳米粒,对其形貌、粒径、电位、稳定性、释药行为等进行研究。(2)DOX@SUR纳米粒克服肿瘤耐药性的研究。通过体外耐阿霉素乳腺癌MCF-7/ADR细胞评价,DOX@SUR纳米粒可影响MCF-7/ADR相关m RNA基因的表达,抑制耐药细胞的增殖和促进耐药细胞的凋亡,从而能增强MCF-7/ADR对阿霉素的敏感性。DOX@SUR纳米粒不诱导耐药MCF-7/ADR细胞P-糖蛋白(P-glycoproteins,P-gp)表达量升高,促使胞内阿霉素外排速率降低且蓄积增加。通过体内实验评价,DOX@SUR纳米粒可以被动靶向肿瘤,增加其在肿瘤部位的蓄积,具有良好的抑制耐药肿瘤生长的效果和生物安全性。(3)pH和光热双重响应的智能纳米药物DOX@pPGNCs的制备与表征。首先合成具有不同低临界溶解温度(Lower critical solution temperature,LCST)的温敏聚合物PLOEG、POEG和PHOEG(LCST分别为31.6、41.6和52.2℃),将聚合物分别与GNCs偶联,考察其在37℃的载药和光控释药能力,确定最适LCST的POEG(其LCST为41.6℃)修饰的PGNCs,进行后续的研究;并偶联酸敏靶向肽(pH low insertion peptide,pHLIP)获得pPGNCs,pHLIP通过对弱酸性肿瘤微环境的响应,经历了从随机无序构象到α-螺旋的构象转变,使其插入到肿瘤细胞膜中,从而达到靶向肿瘤细胞的目的,增强pPGNCs在肿瘤微酸环境中主动靶向细胞的能力;然后通过硫酸铵梯度法载药获得pH及光控响应的智能纳米药物DOX@pPGNCs。对其形貌、粒径、电位、稳定性、释药行为等进行研究,证明了DOX@pPGNCs的光热效应及光控释药功能。(4)DOX@pPGNCs体外细胞及体内克服耐药的药效学研究。通过细胞摄取研究证明了DOX@pPGNCs具有酸敏靶向功能,该功能不受肿瘤细胞耐药的影响并且具有一定的普适性。进一步发现DOX@pPGNCs在细胞内具备光热控制的释药特性。其次通过细胞毒性等研究确定了DOX@pPGNCs对肿瘤耐药细胞具有化疗与光热协同作用的能力。在荷MCF-7/ADR瘤的裸鼠模型中,DOX@pPGNCs不仅具有良好的体内光热效率及肿瘤靶向能力,还具有较强的肿瘤深部穿透以及克服肿瘤耐药能力,且具有一定的生物安全性。在本论文中,构建了两种类型的纳米药物,分别实现多种药物和多种治疗方式的协同作用,增加肿瘤耐药细胞对化疗药物的敏感性,克服肿瘤耐药,同时增强药物在肿瘤部位的蓄积,降低不良反应,这些研究有望为克服肿瘤耐药提供新思路。