本实验以凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)和中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)为实验对象,采用单尾、定量的方法进行白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)口饲感染,对凡纳滨对虾新品种“壬海1号”体重性状和抗WSSV存活时间遗传力以及两者的遗传相关进行评估,并从WSSV侵染后相同温度和不同温度条件下感染WSSV后存活时间、存活率以及感染后不同时间对虾体内病毒载量等多个角度,进一步比较凡纳滨对虾和中国明对虾对WSSV的敏感性差异;以期阐明不同对虾种类对WSSV抗病性的差异及影响因素,为抗病良种选育工作提供理论基础与参考。具体研究内容如下:1.凡纳滨对虾体重和抗WSSV性状遗传参数评估为评估4月龄凡纳滨对虾“壬海1号”体重性状和抗WSSV性状的遗传参数,对101个家系的3000尾凡纳滨对虾进行为期15 d的抗WSSV性能测试。利用动物模型估计其体重和抗WSSV性状遗传力以及两者的遗传相关。结果表明,凡纳滨对虾“壬海1号”体重的遗传力估计值为0.10~4±0.276,感染WSSV后存活时间的遗传力估计值为0.145±0.073,均属于低等遗传力水平,经统计检验差异显著(P<0.05)。体重与感染WSSV后存活时间遗传相关与表型相关系数分别为0.69和0.47,属于中度正相关,Z-score检验结果达到极显著水平(P<0.01)。结果表明,本群体中遗传变异较小,可以考虑通过多构建家系,提高选择强度等方法进行改良。并且需要采用经济加权或者百分比加权的形式,制定多性状综合选择方案,以培育出综合性状的优良品种。2.中国明对虾和凡纳滨对虾对白斑综合征病毒(WSSV)敏感性比较本实验分别对中国明对虾野生群体(Wild-F.chinensis,W-Fc)、中国明对虾选育群体“黄海2号”(Selected-F.chinensis,S-Fc)和凡纳滨对虾商业一代苗种(Commercial-L.vannamei,C-Lv)三组对虾采用单尾定量饲喂感染WSSV的方法进行感染实验,比较W-Fc、S-Fc及C-Lv对WSSV的敏感性差异。结果表明,感染同等含量WSSV后,W-Fc、S-Fc和C-Lv的平均存活时间分别为124.11±39.49 h、166.15±51.54 h和136.90±41.99 h,显示出三组对虾间的平均存活时间存在显著性差异(P<0.05)。三组对虾在感染期间的死亡趋势为:W-Fc在第96 h达到死亡高峰,并且一直持续到216 h;S-Fc和C-Lv在144 h出现死亡高峰。另外,分别在感染后的第3 h、6 h、12 h、24 h、36 h、48 h、72 h、144 h共8个时间点对三组对虾进行活体取样,利用实时荧光定量RT-PCR(Real Time-Polymerase Chain Reaction)技术对其进行了病毒载量检测,从对虾存活时间和体内肌肉组织病毒载量的角度探寻不同对虾抗病性能的差异,结果如下:第48 h时,W-Fc、S-Fc和C-Lv三组对虾体内肌肉组织的病毒载量分别为1.22×106±6.14×105 copies/ng DNA、7.10×10~3±7.26×102 copies/ng DNA和1.50×10~4±4.19×10~3 copies/ng DNA;第144 h时,三组对虾体内肌肉组织病毒载量分别为8.44×106±1.25×106 copies/ng DNA、3.21×106±8.21×105 copies/ng DNA和1.49×106±6.59×105 copies/ng DNA。实验结果显示三组对虾对WSSV敏感性从高到低依次为中国明对虾野生群体、凡纳滨对虾商业苗种、中国明对虾选育群体,表明中国明对虾选育群体“黄海2号”在人工感染WSSV条件下表现出了良好的抗病性能。3.不同温度下凡纳滨对虾和中国明对虾对白斑综合征病毒(WSSV)耐受性比较分别对凡纳滨对虾“壬海1号”(L.vannamei“Renhai No.1”)和中国明对虾“黄海2号”(F.chinensis“Huanghai No.2”)在三种温度条件下(24℃、28℃和32℃),采用单尾定量饲喂感染白斑综合征病毒的方法进行感染实验,比较两组对虾在不同温度情况下对WSSV的耐受性差异。结果表明,L-24℃和F-24℃组的平均存活时间分为184.05±69.56 h和101.68±38.45 h;L-28℃和F-28℃组的平均存活时间分别为100.25±26.79 h和73.38±22.22 h,相同温度组内均存在显著性差异(P<0.05);截至第15 d,L-32℃和F-32℃组的存活率分别为45.74%和23.47%。三个温度组对虾在50%死亡率时的存活时间分别为178 h和98 h、98 h和74 h、292 h和78 h;死亡高峰时间分别为第5 d和第4 d、第5 d和第4 d、第10 d和第4 d。另外,分别在感染后的第12 h、24 h、48 h、72 h、96 h、120 h、144 h、168 h、15 d共9个时间点对每组对虾进行活体取样,利用实时荧光定量技术对其进行了病毒载量检测,从对虾体内肌肉组织病毒载量的角度探寻不同对虾抗病性能的差异。第144 h时,L-24℃和F-24℃组对虾肌肉内病毒载量分别达到2.97×106±7.44×106和8.08×106±3.22×106 copies/ng DNA,差异极显著(P<0.01),L-28℃和F-28℃组分别达到6.73×106±1.49×106和1.20×107±6.15×105 copies/ng DNA,表现出极显著差异(P<0.01);第15 d,L-32℃和F-32℃组分别达到5.18×10~3±4.32×10~3和3.78×10~4±8.97×10~3 copies/ng DNA,表现出显著性差异(P<0.05)。实验结果显示两种对虾在三种温度环境下感染WSSV后,凡纳滨对虾耐受WSSV能力要高于中国明对虾;不同温度下同种对虾肌肉体内WSSV的增殖能力从强到弱依次为:28℃组、24℃组和32℃组。