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日本沼虾(Macrobrachium nipponense)、罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)和南美白对虾(Penaeus vannmei)都属节肢动物门甲壳纲十足目游泳亚目虾科,是我国主要的水产养殖虾类。本文对这三种虾五种组织的酯酶(EST)、过氧化物酶(POD)、碱性磷酸酶(ALP)以及酸性磷酸酶(ACP)等四种酶的同工酶进行研究。利用同工酶分析技术对同工酶的组织特异性、活力和细胞内分布等基础生理特性进行研究,为本课题深入研究同工酶变化与疾病之间的关系提供理论基础。 一、酯酶(EST)同工酶的研究 以日本沼虾、罗氏沼虾和南美白对虾三种养殖虾类为材料,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和分光光度法对EST同工酶进行研究。酶性质研究结果显示:EST是一种偏碱性的酶,三种虾EST反应的最适pH均为pH8.0;罗氏沼虾EST在pH8.5时稳定性最高,而日本沼虾和南美白对虾EST在pH8.0时稳定性最高;日本沼虾和南美白对虾EST反应的最适温度均为40℃,罗氏沼虾为45℃;日本沼虾和罗氏沼虾EST的热稳定性较差,60℃保温5min酶活力就下降至原活力的25%;三种虾五种组织中肝脏的EST活力最强,之后依次为心脏、鳃、复眼、肌肉。电泳结果显示:EST在三种虾五种组织之间存在明显的组织特异性,肝脏中EST表达酶带最多、最复杂,复眼和肌肉中表达较少;南美白对虾和罗氏沼虾病体与健康体中EST酶谱差异显著,各组织均有变化,肝脏的变化最为明显。 二、过氧化物酶(POD)同工酶的研究 以三种养殖虾类为研究对象,对POD同工酶进行研究比较,酶性质研究结果显示:日本沼虾、罗氏沼虾和南美白对虾POD活力由高到低依次均为肝脏、心脏、肌肉、复眼、鳃,南美白对虾的POD活力远低于日本沼虾和罗氏沼虾的酶活力;日本沼虾POD反应的最适pH为pH6.0,而罗氏沼虾和南美白对虾的最适pH均为pH6.5;日本沼虾POD的pH稳定性较罗氏沼虾和南美白对虾差,在pH8.0时稳定性最高,高于或低于pH8.0时,酶活力迅速下降;日本沼虾POD反应的最适温度为50℃,高于或低于这个温度酶活力迅速下降,罗氏沼虾和南美白对虾POD活力在37℃~50~C之间变化不大,