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体外环境下,研究金荞麦提取物FR(Fagopyrum cymosum)联合刺梨提取物CL(Rose roxburghii Tratt)对人胃癌细胞株SGC-7901及人肺癌细胞株A-549增殖的影响。了解FR与CL联合应用时的相互作用,并初步探讨其作用机制。
方法:
利用MTT法检测FR、CL及上述药物联合应用对SGC-7901、A-549细胞的增殖抑制率;流式细胞术分析早期凋亡细胞比;通过RT-PCR和Western Blot技术在mRNA和蛋白水平分析上述药物对Ki-67、Bax、Bcl-2及Bcl-2/Bax表达的变化。
结果:
48小时SGC-7901细胞,FR的六个浓度组(7.5mg/L,15mg/L,30mg/L,60mg/L,120mg/L,240mg/L)的抑制率为(6.19±0.62)%,(11.65±1.06)%,(19.37±1.02)%,(27.46±1.18)%,(35.39±1.11)%,(53.374±1.36)%;CL的六个浓度组(5mg/L,10mg/L,20mg/L,40mg/L,80mg/L,160mg/L)的抑制率为(3.92±0.25)%,(8.39±1.41)%,(14.41±0.80)%,(23.49±1.15)%,(30.73±1.09)%,(44.00±1.53)%。差异均具统计学意义(P<0.05)。
48小时A-549细胞,FR的六个浓度组(7.5mg/L,15mg/L,30mg/L,60mg/L,120mg/L,240mg/L)的抑制率为(5.17±0.51)%,(13.87±0.44)%,(21.01±1.76)%,(26.45±0.76)%,(33.73±0.69)%,(48.31±1.75)%:CL的六个浓度组(5mg/L,10mg/L,20mg/L,40mg/L,80mg/L,160mg/L)的抑制率为(3.69±1.48)%,(8.46±1.04)%,(13.00±0.19)%,(23.95±0.84)%,(31.66±0.38)%,(40.96±1.62)%。差异均具统计学意义(P<0.05)。
IC30浓度FR、CL单药和1/2IC30(FR)+1/2IC30(CL)联合对SGC-7901细胞的抑制率分别为(33.89±0.22)%,(30.86±1.17)%和(44.25±0.50)%,对A-549细胞地的抑制率分别为(30.91±1.72)%,(29.07±1.41)%和(43.62±2.15)%。流式细胞术结果表明对照组、FR组、CL组、联合组细胞早期凋亡比率依次增加,分别为:(3.204±0.16)%,(27.63±1.74)%,(25.304±2.22)%,(35.604±2.76)%(SGC-7901)和(4.91±0.47)%,(22.87±2.35)%,(23.814±1.57)%,(31.90±2.69)%(A549),两单药组及联合组与对照组之间、联合组分别与两单药组之间的差异均具相统计学意义(P<0.05);与单药组比较,联合组Ki-67、Bcl-2 mRNA/蛋白表达率有显著降低(P<0.05),而Bax mRNA/蛋白表达显著增高(P<0.05)。
结论:
FR、CL分别具抑制SGC-7901及A-549细胞增殖和诱导其凋亡的作用,并呈剂量依赖特点,二者联合后上述作用存在协同现象。发生协同作用的机制可能与联合后显著上调Bax和下调Bcl-2、Ki67有关。