研究背景
　　季节性流感病毒感染严重威胁人类健康，每年全球范围内估计有300-500万流感感染重症病例，25-50万人死亡。小分子药物如神经氨酸酶抑制剂可用于流感感染治疗，但此类药物治疗窗口期短且易出现耐药性毒株限制其抗病毒治疗效果。季节性流感疫苗接种者或流感病毒感染者体内可诱导产生流感病毒表面糖蛋白血凝素蛋白特异性和广谱性中和抗体。筛选有价值的中和抗体可用于流感感染的预防和治疗。
　　研究目的
　　分离针对H3N2流感病毒的中和抗体，研发有治疗价值的中和抗体治疗药物，为广谱流感疫苗的研制提供思路。
　　方法
　　我们收集季节性流感疫苗接种者的外周血样品，建立高通量体外培养记忆性B细胞体系，分析记忆性B细胞培养上清对血凝素(A/Perth/16/2009（H3N2）)蛋白的结合活性，克隆血凝素特异性反应的B细胞的抗体重链和轻链可变区基因，在体外表达抗体，以复制性重组荧光流感病毒鉴定有中和活性的抗体，利用ELISA和血凝抑制等实验方法对抗体功能进行分析，鉴定抗体识别血凝素蛋白的抗原表位。
　　结果
　　选取具有高中和滴度的季节性流感疫苗接种者外周血记忆性B细胞进行培养，分离到7株（31G5、31B6、31E6、31D7、33A1、33A3和33B1）对A/Perth/16/2009（H3N2）病毒血凝素蛋白有结合活性的抗体，其中有4株抗体（31G5、31B6、31E6和31D7）对H3/Victoria/361/2011-Gluci有中和活性。这4株抗体对当代的H3N2毒株（A/Switzerland/9715293/2013和A/HongKong/4801/2014）有血凝抑制活性，对当代H3N2毒株（A/Perth/16/2009、A/Switzerland/9715293/2013、A/Texas/50/2012）血凝素蛋白有结合活性，证明抗体结合表位位于血凝素蛋白球部受体结合位点附近。对A/HongKong/1/1968(H3N2)病毒无血凝抑制活性，与该病毒血凝素蛋白也无结合活性，推测这4株抗体识别的抗原表位在A/HongKong/1/1968(H3N2)毒株与当代H3N2毒株之间存在差异的靠近血凝素蛋白球部受体结合位点的抗原决定簇A和B。
　　结论
　　我们建立了一套完整的记忆性B细胞体外培养筛选抗体体系，本研究方法和体系可用于新发突发传染病人源抗体筛选。筛选对H3N2病毒中和活性抗体有利于解析H3N2病毒的变异和进化特征，评估疫苗效力，开发有价值的抗体用于临床流感感染的预防和治疗。