免疫层析试纸条对志贺毒素Ⅱ型和寨卡病毒的分析检测

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免疫层析是起源于上世纪 80 年代的一种新型免疫分析技术,后来该技术在食品检测,环境保护等领域也被广泛应用。近年来人们将该技术逐渐应用到医用临床检测中,它以操作简单,成本低,检测快速准确等优势受到科研人员的青睐。目前很多危害性大,传染能力强的很多病毒大多采用的是核酸检测跟酶联免疫吸附剂测定,这两种方法操作繁锁,用时较长,需要借助很多设备仪器一起才能完成整个检测过程,因此这些病毒仍然无法达到有效快速的检测目的。为了解决这一类问题,通过建立的免疫层析试纸条平台对病毒抗原进行定性、半定量以及定量检测,这简单有效的方法可以取代过去传统检测方法。本论文的基本内容可分为以下三个部分:
  1. 基于胶体金对志贺毒素Ⅱ型的检测
  在本章中,通过制备的免疫层析试纸条平台以及合成的胶体金性质,可以达到在10min内志贺毒素Ⅱ型(STX2)达到快速定性检测的目的。在仅用眼睛观察的情况下,根据测试(T)线上的颜色变化,可以判断检测限25 ng/mL左右,反复检测后结果稳定。设计制备的这款试纸条携带方便,储存时间长,检测时无需借助任何仪器设备,只需要滴加50μL的标准液即可,即使是在偏远地区也可进行即时检测。该试纸条为以后抗原的定性检测提供了一种极为简单的检测方式,具有大规模商业应用前景。
  2. 基于CdTe量子点对志贺毒素Ⅱ型的检测
  在本章中,更换选用水相CdTe量子点来对STX2进行检测。基于CdTe量子点的免疫层析试纸条可以对STX2进行半定量分析检测,量子点的特殊性质也使得检测限相比胶体金探针进一步降低。在紫外灯下,通过T线上的荧光强度的变化,可以分析得出检测限可以降低到10 ng/mL。这种试纸条的建立可以实现对STX2的快速定量检测,为未来抗原的检测提供了一种新的半定量方法。
  3. 基于荧光纳米硅球对寨卡病毒的检测
  在本章中利用了一种复合型材料,以二氧化硅球里包含油相ZnCdSe/ZnS核壳量子点的方式形成二氧化硅荧光纳米球。将该材料作为探针制备的免疫层析试纸条对寨卡病毒进行定量分析检测原因在于核壳油相量子点的荧光效率比水相量子点高,因此它应用在生物检测中更能降低检测限。但是为了克服它不亲水的缺点,所以将其包在二氧化硅中,这样也同时避免了金属离子对环境的影响。在对寨卡病毒的检测中,通过 Image J 软件分析拍摄后的检测图像可知检测限已经低至100 pg/mL。检测过程中T线上荧光强度的增强随着抗原浓度的增强变化明显。检测结果在滴加样品后15min观察最佳。实验表明制备的试纸条特异性,重现性,稳定性都极佳。这证明了免疫层析试纸条平台具有可靠的实际应用能力。
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