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目的:通过复制慢性应激肝郁雌性大鼠模型,并以舒肝中药进行干预,分析肝郁对女性排卵功能及血清IL-1β、IL-6的含量的影响,初步探讨肝郁与排卵功能障碍的关系及舒肝中药的作用机理,为排卵功能障碍的治疗提供更为开阔的科研思路和临床治疗依据。
方法:以90日龄的Wistar雌性大鼠为研究对象,利用束缚筒和程控穿梭箱声一电刺激复制慢性应激肝郁大鼠模型,以绒毛膜促性腺激素(HCG)、尿促性腺激素(HMG)和中药舒肝补肾方为实验用药。将60只性周期表现正常的大鼠随机分为5组,即正常对照组(正常组)、模型对照组(模型组)、阳性对照组(阳性组)、舒肝补肾方高剂量组(舒肝补肾高组)、舒肝补肾方低剂量组(舒肝补肾低组),每组12只。在同种饲养条件下,造模的同时,正常组和模型组灌以等量蒸馏水,舒肝补肾高、低组分别灌以舒肝补肾方浸膏稀释液高剂量(生药浓度约3.744g/ml)和低剂量(生药浓度约1.872g/ml),连续造模及给药20天。阳性组在造模的前17天同模型组一样给予蒸馏水,第18天每只大鼠腹腔注射HMG40IU,48h后再腹腔注射HCG50IU,24h后处死。造模20天后,除阳性组外其余各组经阴道涂片观察挑选处于动情期的大鼠并间隔24h处死,进行指标测定。动态观察大鼠动情周期的变化;解剖取出输卵管并捡出卵子,镜下观察卵子形态,初步评估卵子质量;对照观察卵巢组织形态学的改变;用放射免疫法检测大鼠血清IL-1β、IL-6的含量。
结果:(1)同正常组相比,模型组大鼠的性周期出现不同程度的紊乱;卵子质量较差,卵丘颗粒细胞层次较少,排列致密,脱颗粒细胞后较少见到极体;卵巢组织形态学观察,原始细胞数显著增多(P<0.05),黄体数显著减少(P<0.05);血清IL-1β含量异常显著降低(P<0.05)。(2)注射阳性药HMG和HCG后,同模型组相比,阳性组大鼠的紊乱性周期并无明显改善:卵子数量明显增多,卵丘颗粒细胞的数量和范围相应增大,脱颗粒细胞后多数未见极体;卵巢组织形态学观察,黄体数显著增多(P<0.05);血清IL-1B含量显著升高(P<0.05),IL-6的含量无显著差异(P>0.05)。(3)经中药治疗后,舒肝补肾高、低组大鼠的紊乱性周期得到改善;一定程度上提高了卵子质量,卵子卵丘颗粒细胞数量和范围较大,排列松散,脱颗粒细胞后多数可见极体;卵巢组织形态学观察,卵巢组织的异常形态得到一定纠正,成熟卵泡数显著增多(P<0.05),黄体显著增多(P<0.05);血清IL-1β含量显著升高(P<0.05),IL-6的含量无显著差异(P>0.05),有类似阳性药的作用。
结论:用束缚筒制动和声—电刺激复制的慢性应激肝郁动物模型,是一个比较合理的肝郁证动物模型。慢性应激刺激可致雌性大鼠神经免疫内分泌功能紊乱,从而导致排卵障碍。本实验证明了中药舒肝补肾方能对抗慢性应激刺激对大鼠的影响,促进排卵功能的恢复。舒肝补肾方能明显改善大鼠性周期的紊乱,其作用优于西药HMG和HCG;并在一定程度上提高卵子成熟度。同时,舒肝补肾方还可改善卵巢的异常形态,有效升高大鼠血清IL-1B、IL-6的水平,促进卵子发育成熟和排卵,有类似HMG和HCG的作用。本实验从多方面探讨了舒肝补肾方对慢性应激肝郁模型大鼠排卵功能的调节作用,为临床运用舒肝补肾法治疗肝郁型排卵功能障碍提供了有价值的客观依据,疗效确切,值得推广应用。