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目的:本实验观察半枝莲醇提物不同浓度的含药血清对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖、凋亡及细胞周期的影响,探讨半枝莲抗肝纤维化的作用及机制。为开发利用盛产于广西的药用植物半枝莲治疗肝纤维化奠定理论和实验的基础。 方法:体外培养 HSC-T6细胞株,移入孔板后按孔数将细胞分成5组:空白血清对照组(第1组)、半枝莲含药血清低浓度组(第2组)、半枝莲含药血清中浓度组(第3组)、半枝莲含药血清高浓度组(第4组)、秋水仙碱含药血清阳性对照组(第5组)。按各组要求往细胞孔内加入相应的工作液。培养孵育48h后,用四氮噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞的吸光度值,计算增殖抑制率。用流式细胞术(PI染色法)检测各周期细胞的DNA含量。用流式细胞术(Annexin-v-FITC/PI双染色法)检测细胞各期凋亡情况。 结果:1. MTT:与空白血清组对照,低、中、高浓度半枝莲含药血清组OD值显著降低,增殖抑制率明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),其48h的增殖抑制率分别为14.1%、23.6%、47.3%,增殖率呈浓度依赖性(P<0.05)。2. PI染色:与空白血清组对照,低、中、高浓度半枝莲含药血清组G0/G1期HSC-T6细胞百分比明显增加(P<0.05),S+G2/M期HSC-T6细胞百分比明显减少(P<0.05),48h的S期+G2/M期细胞总数百分比分别为53.5%、47.6%、39.7%,呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。3.ANNEXIN V-FITC/PI双染色:与空白血清组对照,低、中、高浓度半枝莲含药血清组48h的总凋亡细胞百分比分别为7.75%、15.57%、31.34%。其诱导凋亡的能力呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。4.高浓度半枝莲含药血清组对HSC-T6细胞的增殖抑制率比秋水仙碱含药血清组高、S+G2/M期HSC-T6细胞百分比较秋水仙碱含药血清组少,48h的总凋亡细胞百分比较秋水仙碱含药血清组高,差异均具有显著性(P<0.05)。 结论:1.半枝莲醇提物能抑制 HSC-T6增殖,诱导其凋亡,且其作用呈血清浓度依赖性,高浓度半枝莲含药血清组以上作用优于秋水仙碱对照组。2.半枝莲醇提物抑制 HSC-T6增殖的机制可能是使 HSC-T6细胞周期停滞于G0/G1期,阻止其由G1进入S期。