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【目的】研究云南白药含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和向成骨分化的影响,探讨云南白药促进骨折愈合的药效学作用机理。 【方法】通过形态学观察及向成骨、成脂、成软骨定向诱导分化鉴定大鼠BMSCs。用相当于临床成人等效剂量10倍的云南白药给大鼠灌胃给药,每天2次,连续3天,第4天一次性给予全天药量,于灌胃后1h采血制备含药血清。采用改良MTT法测定含药血清对P2代BMSCs增殖的影响;用对硝基苯磷酸(pNPP)法和茜素红S染色定量法对BMSCs分化为成骨细胞的标志物进行测定。用RT-PCR法对云南白药含药血清促进骨折愈合的作用机制进行初步探讨。 【结果】和对照组相比,5%~20%的含药血清对P2代BMSCs的增殖在第1~7天内均无明显影响(P>0.05);但从第7天开始含药血清处理组ALP活性明显上升,并高于对照组(P<0.01);第14天时,含药血清组APL活性是骨折血清组的1.45倍,21天时钙结节含量是骨折血清组的4.41倍(P<0.01)。7天时含药血清处理组BMSCs核心结合因子(CBFA1)mRNA表达是骨折血清组的1.26倍(P<0.01);14天时血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA的表达是骨折血清组的1.38倍(P<0.01)。 【结论】云南白药含药血清虽然对P2代BMSCs的增殖无明显影响,但能促进BMSCs向成骨细胞分化;云南白药含药血清可促进BMSCs中早期成骨标志基因CBFA1 mRNA的表达和VEGF mRNA的表达。提示云南白药促进骨折愈合的可能机制之一是通过促进BMSCs向成骨细胞分化、影响成骨细胞成熟和诱导骨折周围组织新血管生成来实现的。