【摘 要】
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目的:本文研究目的在于探讨COS对骨肉瘤的抗肿瘤作用及其分子机制的研究。方法:通过酶-膜偶联技术降解壳聚糖以制备COS,采用FITR、HPLC、MSI-MS检测COS的理化特性,通过CCK-8、集落形成实验、伤口愈合实验和Transwell实验分析COS对骨肉瘤细胞增殖和转移的影响。利用流式细胞技术检测COS诱导骨肉瘤细胞周期和细胞凋亡。构建m RFP-GFP-LC3腺病毒及通过TEM直接观察自噬
【基金项目】
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国家自然科学基金(81872182); 国家自然科学基金(81802685); 上海市青年科技英才杨帆计划(18YF1418700);
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目的:本文研究目的在于探讨COS对骨肉瘤的抗肿瘤作用及其分子机制的研究。方法:通过酶-膜偶联技术降解壳聚糖以制备COS,采用FITR、HPLC、MSI-MS检测COS的理化特性,通过CCK-8、集落形成实验、伤口愈合实验和Transwell实验分析COS对骨肉瘤细胞增殖和转移的影响。利用流式细胞技术检测COS诱导骨肉瘤细胞周期和细胞凋亡。构建m RFP-GFP-LC3腺病毒及通过TEM直接观察自噬流及自噬小体的形成。利用转录组测序技术(RNA-seq)、实时聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白质印迹实验用来检测COS处理骨肉瘤细胞后的分子机制。建立骨肉瘤异种移植模型,研究在体内水平COS对骨肉瘤的影响。结果:COS的表征学分析提示COS是由壳二糖、壳三糖、壳四糖、壳五糖和壳六糖组成。细胞活力检测发现COS对骨肉瘤细胞系表现出明显的毒性作用,其50%抑制浓度(IC50)为3.65-11.37mg/ml。另外,与对照组相比,COS明显抑制了细胞周期及转移、促进细胞凋亡并诱导细胞自噬。在分子机制研究中,发现COS能够通过激活骨肉瘤细胞中的p53/m TOR信号通路引起自噬,并最终引起细胞凋亡,在使用p53抑制剂Pifithrin-u时,能显著减弱COS引起的自噬作用。另外在骨肉瘤的异种移植模型中,也发现COS能抑制肿瘤的生长和转移。结论:综上,我们发现不管是在体内还是体外实验中,COS都能够抑制骨肉瘤的生长、促进细胞凋亡,并通过p53/m TOR信号通路的激活引起自噬,最终引起细胞凋亡。我们的研究预示着COS也许能够作为治疗骨肉瘤的潜在的新型治疗候选药物。
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目的:探讨胰腺神经内分泌肿瘤(PNET)患者的临床特征及预后影响因素。方法:收集2012年3月-2019年4月于上海交通大学附属第一人民医院经病理确诊为PNET的54例患者临床资料,分析患者临床、病理、影像学特征及预后情况。计数资料组间比较采用?2检验或Fisher精确检验。采用Kaplan-Meier和Cox比例危险模型进行生存分析,并用Log-rank进行组间差异检验。结果:54例PNET患者
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