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由于干化学体外诊断试剂具有便捷、准确、易携带等优势,近年来备受关注并得到了快速的发展。干化学体外诊断试剂的多功能层具有扩散、固定试剂、过滤等多种作用,其制备材料需具备球形良好、粒径适中且均一、表面易功能化等特点。而聚苯乙烯微球是制备干化学体外诊断试剂多功能层材料的较佳选择之一。为研发扩散性能好、测试结果准确率高、重复性好的干化学体外诊断试剂,制备粒径均一且大小合适、表面反应能力强的羧基化聚苯乙烯微球是关键因素之一。本文以苯乙烯为原料,采用两步分散聚合法成功制备了聚苯乙烯微球。考察了分步方式、加料方式、反应温度、搅拌速度等因素对合成聚苯乙烯微球的影响,得出了适宜的制备条件;并分别考察了单体浓度、溶剂种类、稳定剂浓度和引发剂浓度对聚苯乙烯微球粒径的影响,制备出粒径为1.3~23.3μm的聚苯乙烯微球,实现了微球粒径的可控化。以制备聚苯乙烯微球的实验条件为基础,引入丙烯酸进行聚苯乙烯微球的功能化。通过改变溶剂种类,控制第一步反应时间、丙烯酸的加入量,成功地将羧基修饰到微球表面,获得表面羧基含量为12.5~57.05 mg/g的羧基化聚苯乙烯微球,实现了微球表面羧基含量的可控化。以羧基化聚苯乙烯微球为原料,制备具备扩散、试剂固定、过滤等功能的羧基化聚苯乙烯多功能层。考察和优化了搅拌时间、明胶浓度、微球堆积方式、微球质量分数、粒径大小、表面活性剂等羧基化聚苯乙烯多功能层制备条件,得到了扩散均匀、扩散速率快、表面光滑的羧基化聚苯乙烯多功能层。将羧基化聚苯乙烯多功能层应用于C-反应蛋白(CRP)干片中。实验结果表明:多功能层扩散均匀且重复性好,含等浓度CRP的血清经多功能层扩散反应后,光反射密度仪的检测结果偏差在±0.18%内;含不同浓度CRP的血清经反应后,测试结果有明显的梯度,符合CRP干片测量规律。因此,羧基化聚苯乙烯多功能层成功地应用于干化学体外诊断试剂中,为进一步的研究奠定了良好的基础。