联合VEGF-165和PDGF-BB促进骨髓间充质干细胞血管化的体内研究

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目的:本实验将VEGF-165与PDGF-BB联合作用于骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cell,BMSC)膜片并植入动物体内,通过对成血管相关因子表达量的检测及新生血管的数量和面积的测量研究联合VEGF-165与PDGF-BB两种生长因子对体内血管发生的作用效果及是否产生协同作用。方法:获取大鼠BMSC并在体外培养成细胞膜片。将细胞膜片按加入生长因子的不同分为VEGF与细胞膜片共培养组(V组);PDGF与细胞膜片共培养组(P组);VEGF联合PDGF与细胞膜片共培养组(V+P组)和对照组(D组)分成4组,对照组仅植入细胞膜片。生长因子与细胞膜片共培养24小时后回执入SD大鼠腹部皮下。分别于术后2周和4周回收标本,利用RT-PCR检测成血管相关因子的基因表达,随机选择各组的组织块进行石蜡包埋并进行切片和HE染色,对染色后的照片用Image Pro-Plus软件计算新生血管的管腔面积、数量同时对新生血管的大体形态进行观察。结果:各实验组成血管因子的基因相对表达量较对照组相比明显增高(P<0.05)。其中V+P组基因表达量增高更为显著。术后2周及4周V组血管管腔面积较对照组明显增大(P<0.05),P组和V+P组管腔面积相比于对照组差异无统计学意义。血管数量计算结果显示,术后2周及4周V+P组血管数量多于其他组,差异有统计学意义(P<0.05)。V组及P组的管腔形态呈不规则形,V+P组管腔形态与对照组一致呈椭圆形。与2周相比4周时新生血管面积未见差异,但4周时血管数量明显多于2周(P<0.05),差异有统计学意义。结论:VEGF-165和PDGF-BB联合应用能促进新生血管的生成,PDGF-BB的加入能改善VEGF-165引起的血管管腔过度扩张,联合应用VEGF-165和PDGF-BB对血管新生过程产生协同作用。
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