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高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)具有高压、高效、高灵敏度、操作方便、应用广泛等优点。现主要应用于化工、医药、商检和食品分析等领域。高效液相色谱的分析原理是利用待测成分与固定相之间的相互作用差异,进而影响色谱柱对不同组分的保留时间,使各组分在流动相的作用下依次流出的顺序不同而实现分离检测。在使用高效液相色谱分析待测物之前,需要对待测样品进行恰当的前处理,运用除杂、富集或萃取等手段都能更好的实现分析目的,从而提高检测的灵敏度和准确性。近年来,各种样品前处理技术发展迅猛,而环保、简单的方法则是广大研究工作者一直追求的目标。本论文分两部分:绪论和研究报告。第一部分绪论介绍高效液相色谱、中草药、中成药和样品前处理技术的发展和应用。第二部分研究报告建立了中药金樱子、石榴皮和中成药咽喉片中黄酮和有机酸提取分离的条件和含量测定。1.超声辅助萃取高效液相色谱法同时测定金樱子中6种活性成分通过超声辅助萃取,高效液相色谱法同时测定金樱子中没食子酸、儿茶素、芦丁、槲皮素、山柰酚和芹菜素6种活性成分。采用InertSustain C18(150 mm×4.6mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇(B)-0.1%乙酸溶液(A);线性梯度洗脱;流速1.0 mL·min-1;紫外检测梯度波长为280 nm(05.00 min)、350 nm(5.0020.00 min);柱温35℃;进样量20μL。该条件下6种成分的分离度良好,标准曲线线性范围良好,R不低于0.9991(n=6)。平均加标回收率(n=3)为96.21%110.39%,相对标准偏差介于1.06%到3.14%。检测限(S/N=3)为0.027-0.75μg·L-1,结果测得金樱子中含有没食子酸450.1μg·g-1、儿茶素2324.6μg·g-1、芦丁182.4μg·g-1、槲皮素20.8μg·g-1、山奈酚8.2μg·g-1、芹菜素12.1μg·g-1。此方法简便、快速、准确,为药用植物金樱子的定量检测和质量监控提供了实验依据。2.离子液体超声辅助萃取-HPLC法测定石榴皮中7种有机酸和黄酮类化合物以1-辛基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐([Omim][PF6])作为萃取剂超声辅助萃取-HPLC法同时测定石榴皮中没食子酸、儿茶素、绿原酸、表儿茶素、咖啡酸、槲皮素、山柰酚7种活性成分,并通过单因素试验和正交试验结合优化提取条件。采用InertSustain C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇(B)-0.2%磷酸溶液(A);线性梯度洗脱;流速0.7 ml·min-1;紫外检测波长为280 nm;柱温35℃;进样量20μL。该条件下7种成分的分离度良好,标准曲线线性范围良好,R>0.9992(n=6)。加标回收率(n=3)介于91.52%和105.41%之间(RSD<2.19%),检测限(LODS)范围为0.086-0.503μg·L-1。实验最终确立了最佳提取条件为:检测波长280 nm,甲醇体积分数50%,固液比1:80(g·mL-1),超声时间20 min,超声功率160 W。3.高效液相色谱法同时测定4种咽喉片中的8种有机酸和黄酮类化合物通过单因素试验对喉舒宁片、健民咽喉片、清咽片、咽炎片四种中成药中的有机酸和黄酮类化合物的测定进行条件优化,建立超声辅助萃取-HPLC法同时测定其中的没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、槲皮素、山柰酚、芹菜素8种活性成分的最佳条件和含量。采用InertSustain C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇(B)-0.2%醋酸溶液(A);线性梯度洗脱;流速0.7 ml·min-1;紫外检测波长为254 nm;柱温30℃;进样量20μL。该条件下8种成分的分离度良好,标准曲线线性范围良好,R>0.9994(n=8)。加标回收率(n=3)平均值为为89.62%108.43%(RSD%<3.08%)。实验结果显示,四种咽喉片中健民咽喉片的8种活性成分含量最高,本方法通过建立一种简单准确的实验条件同时测定多种物质的有效成分含量,这为中成药咽喉片质量管理供了一定的实际依据。