【摘 要】
：
目的:探究余甘子水提物抗肝纤维化药效作用,筛选其抗纤维化活性部位并探索其作用机制。方法:（1）Wistar雄性大鼠随机分为对照组、模型组、余甘子水提物低剂量组（0.9 g/kg）、余甘子水提物中剂量组（1.8 g/kg）、余甘子水提物高剂量组（3.6 g/kg）和水飞蓟素组（42 mg/kg）,腹腔注射2 m L/kg 50%CCl4-橄榄油溶液8周复制肝纤维化模型,同时灌胃给药8周。收集大鼠血液
论文部分内容阅读
目的:探究余甘子水提物抗肝纤维化药效作用,筛选其抗纤维化活性部位并探索其作用机制。方法:（1）Wistar雄性大鼠随机分为对照组、模型组、余甘子水提物低剂量组（0.9 g/kg）、余甘子水提物中剂量组（1.8 g/kg）、余甘子水提物高剂量组（3.6 g/kg）和水飞蓟素组（42 mg/kg）,腹腔注射2 m L/kg 50%CCl4-橄榄油溶液8周复制肝纤维化模型,同时灌胃给药8周。收集大鼠血液与肝组织,使用生化法检测大鼠血清中肝功能指标丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平;使用苏木精-伊红（H＆E）、天狼星红和Masson染色法观察大鼠肝脏组织病理变化及纤维结缔组织的增生情况;使用酶标仪检测大鼠血清和组织中丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、蛋白碳基（PC）、过氧化氢酶（CAT）等氧化指标和羟脯氨酸（Hyp）水平;用ELISA法测定大鼠血清中层粘连蛋白（LN）、透明质酸（HA）、III型前胶原（PCIII）、IV型胶原（IV-C）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）及转化生长因子-β1（TGF-β1）水平,以此来确定其药效作用以及最佳治疗剂量。（2）采用水提醇沉法将余甘子水提物分为小分子部位和大分子部位,并采用最佳治疗剂量通过已经建立的大鼠肝纤维化模型再次进行药效学评价。为了进一步研究其作用机制,（3）采用TMT蛋白质组学技术分析不同组之间的蛋白差异,然后用生物信息学技术分析差异蛋白,即采用DAVID对差异蛋白进行基因本体论（GO）功能富集分析及京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。采用String数据库与Cytoscape软件构建差异蛋白相互作用网络图,结合文献筛选出抗纤维化可能靶点,并采用Western blot验证余甘子水提物有效部位调控的关键潜在靶点。结果:（1）余甘子水提物（1.8、3.6 g/kg）可显著降低大鼠血清或肝组织中ALT、AST、LN、HA、PCIII、IV-C、MDA、NO、PC、TNF-α、IL-1β、IL-6和Hyp水平,升高SOD、GSH和CAT水平。H＆E染色、天狼星红染色和Masson染色显示余甘子水提物治疗改善了大鼠纤维化病变和炎症细胞浸润。同时,余甘子水提物给药也显著下调了大鼠肝组织中α-SMA和血清中TGF-β1的表达。（2）余甘子水提物及其小分子部位可显著降低由CCl4引起的ALT、AST、IV-C、PCIII、HA、LN与Hyp水平的升高,H＆E和Masson染色显示余甘子及其组分小分子部位治疗改善了肝细胞气球样变和纤维化病变。（3）余甘子小分子部位干预后共筛选到195个差异蛋白（DEPs）。GO分析表明,差异蛋白主要与细胞外基质（ECM）组织、肌动蛋白结合和细胞外泌体有关。KEGG通路分析表明,差异蛋白主要与ECM-受体相互作用、细胞黏附（Focal adhesion）和PI3K-Akt信号通路有关。结合GO、KEGG和western blot结果,COL1A2、ITGAV、TLR2、ACE和PDGFRB可能是余甘子治疗肝纤维化的潜在靶点。结论:余甘子水提物可通过抗氧化、抗炎、减少胶原沉积、减少肝星状细胞的活化对肝纤维化具有一定的治疗作用,且小分子量组分被确定为最佳抗肝纤维化活性部位,其在肝纤维化治疗中通过多途径、多靶点调控发挥治疗作用。
其他文献
多足摇蚊属（Polypedilum）是摇蚊科最大的属级分类单元之一,广泛分布于除南极洲之外的生物地理区,目前世界上已记载种类超过544种。多足摇蚊属幼虫常用于中度耐污染型水质的指示生物,此外,某些种类幼虫又会对水生作物进行啃食,因此对多足摇蚊属昆虫进行研究具有重要的生态和经济价值。然而对于多足摇蚊属来说,各亚属的划分以及某些种类的归属一直具有较大争议,各国研究学者研究观点不一。随着多足摇蚊属昆虫愈
由不可降解的合成纤维制成的渔网无法在海水中自然降解,由此造成的“白色污染”和“幽灵捕捞”问题已经严重威胁到海洋的生态环境,为了保护海洋生态环境,减少因遗弃的不可降解渔网造成的“白色污染”及“幽灵捕捞”的危害,研究开发环保可降解渔用材料已成为我国现代渔业可持续发展的重大问题之一。纳米蒙脱土（MMT）是典型的层状硅酸盐矿物之一,在聚合物中添加少量（3%～5%）的MMT后可获得性能良好的复合材料。纳米改
癌症是全世界的主要死因。多糖对肿瘤的作用机制是多样化的。多糖具有多种生物活性,因为它们的复杂结构,这使得它们成为最重要和最有吸引力的生物大分子之一。研究多糖的抗癌活性,必须研究多糖和多糖化合物在生物系统中的功能。在以前的研究中,多糖只用作一种结构材料或储能材料。缺乏对多糖在生活系统中的作用的研究,必然导致多糖资源利用不足。然而近十多年以来,多糖由于其副作用小、基本无毒性和生物活性丰富被广泛应用于科
翘嘴鳜（Siniperca chuatsi）是中国水产养殖中一种重要的特色品种。DNA甲基化是一种表观遗传学调控重要机制,其发挥作用的主要基因是DNA甲基化酶。DNA甲基化酶（dnmts）作为一类基因家族,以往研究中主要集中于人类、小鼠、果蝇和斑马鱼等的模式生物中。本实验立足于分子生物学的角度,详细分析了dn mts在鳜的发育过程和不同组织的表达分布,探讨了其在鱼类性腺发育和胚胎发育过程中的作用,
草鱼（Ctenopharyngodon Idella）年产超过五百万吨,广泛分布于我国各地,草鱼养殖业产值约为每年700亿至800亿元,是我国主要的淡水养殖鱼类品种之一。草鱼出血病作为我国农业农村部所认定的二类动物疫病,每年给我国的草鱼养殖业带来巨大的经济损失,对于草鱼水产养殖行业造成了极为迫切的威胁。草鱼呼肠孤病毒（Grass carp reovirus,GCRV）是草鱼出血病的主要病毒性病原体
近年来,随着罗氏沼虾养殖产业的发展,养殖规模越来越大,产量越来越高,但养殖问题也随之而来,“铁壳虾”的出现成为困扰养殖户的难题。关于罗氏沼虾生长缓慢的原因,目前还没有明确的定论,许多学者从病害、生长基因、激素、营养等方面探究对罗氏沼虾生长的影响。在能量代谢方面,关于甲壳动物的生长与线粒体中参与ATP合成的酶的关系还尚未报道,线粒体中参与ATP合成的酶包括NADH脱氢酶（ND）、细胞色素C氧化酶（C
牙鲆是我国重要的海水养殖种类之一。近年来,病毒性疾病特别是淋巴囊肿病的爆发给养殖户带来了严重的经济损失,导致牙鲆养殖问题频发,产量下降。生物技术的发展,推动了现代种业的发展,也成为良种选育的新手段。选择性剪接是与剪接一起发现的,并使一个基因产生多个m RNA亚型,并编码具有不同功能的蛋白质,增加了蛋白质组的多样性,但是正常剪接模式的中断会导致基因功能障碍甚至疾病。三重基序（TRIM）和TRIM样蛋
体色是生物一个重要的生物学性状,在生物体的生存、伪装、求偶和繁衍中起着重要作用。鱼类体色丰富多样,其不同体色图案的形成涉及了色素的合成与转移以及色素细胞的分化与运输,且许多基因参与调控该过程。黑素亲和素（melanophilin,Mlph）是Rab效应蛋白的一个亚家族成员,在脊椎动物的成熟黑素小体运输过程中起着关键性作用,其突变会引起动物的毛色变淡等现象发生,但目前其在水产动物中的研究却极为薄弱。
免疫球蛋白超家族（Immunoglobulin Superfamily,IgSF）是一类分子结构中有与免疫球蛋白类似的结构域的分子超家族,主要以膜蛋白形式存在于细胞表面。其中免疫球蛋白（Immunoglobulins,Igs）、主要组织兼容性复合体（Major histocompatibility complex,MHC）和T细胞抗原受体（T cell receptor,TCR）三类分子均是与抗原
大肠杆菌（Escherichia coli,E.coil）是全球主要的食源性病原体之一,能够感染多种动物并污染其肉制品。随着抗菌药物的滥用,大肠杆菌耐药性日趋严重,其耐药性可通过多种途径进行传播,引起交叉耐药的同时严重威胁人畜健康。因此,本研究对四川省不同动物源大肠杆菌进行耐药性检测、耐药基因和毒力基因检测与相关性分析,为本地区大肠杆菌病预防和控制奠定基础。试验结果列举如下:1.分离菌株对27种抗