目的探讨鼻咽癌前病变四诊信息的规范化采集方案,并在此基础上建立鼻咽癌前病变证素计量辨证的相关标准,同时运用亚细胞差异蛋白质组学策略,对其常见证型的相关分子本质进行初步探讨。方法1.在文献调查研究、专家组讨论的基础上,筛选出与鼻咽癌前病变相关的证候、证素、证型,然后参照国际通用调查表的设计,研制出鼻咽癌前病变证候、证素、证型调查表并对该表的信度和效度进行检测。2.运用鼻咽癌前病变证候、证素、证型调查表进行流行病学调查并建立数据库,通过双层频权剪叉算法计算出各证候对相关证素的辨证贡献度,设定证素诊断标准(阈值判断),然后对调查病例进行证素计量辨证,将辨证结果与专家组辨证结果进行比较,检验二者的一致性,并对该病的证型分布特点进行分析。3.选取鼻咽癌前病变的主要证型中证素计量分值较高的患者,以健康人为参照,提取外周血淋巴细胞核蛋白进行二维电泳分离,找出差异表达蛋白质斑点,并进行MALDI-TOF质谱分析,联系差异表达蛋白的生物学特性,对相关证型的分子本质进行初步探讨。结果1.研制出了鼻咽癌前病变证候、证素、证型调查表,并对其信度和效度进行了检验,结果显示：调查表具备良好的内部一致性信度和重测信度,内容符合中医理论及临床实际,具备较好的真实性和可靠性。2.建立了鼻咽癌前病变证候辨证数据库,赋予了各证候的相关证素辨证贡献度,设定出证素诊断标准(阈值判断),并对证素计量辨证结果与专家组辨证结果进行了对照,显示出二者高度的一致性。3.专家组辨证及证素计量辨证结果均显示,气虚证和湿热证是鼻咽癌前病变的主要证型。4.三组研究对象共获得10张2-DE凝胶图谱,其二维电泳图谱比较相似,3组标本的组内凝胶图谱匹配率都达到了89%以上,对比组组间的匹配率在79%以上,每张凝胶电泳图蛋白质点平均点数为447个,在IEF方向点的偏移率为1.67±0.19 mm,在SDS-PAGE方向的偏移率为2.37±0.53mm。5.从三组的2-DE凝胶图谱中,分别选取6个蛋白质表达水平差异在3倍以上的蛋白质斑点用作比较分析。结果显示：鼻咽癌前病变气虚证组与健康组比较,气虚证组在1、2、4号蛋白质点高表达而健康组无表达,在3、5号蛋白质点气虚证组表达上调,在6号蛋白质点气虚证组表达下调；湿热证组与正常人组比较,正常人组在7、8、9、10号蛋白质点无表达,在11号蛋白质点湿热证组的表达水平下调,在12号蛋白质点,湿热证组表达水平上调；气虚证组与湿热证组比较显示,气虚证组在13、14号蛋白质点的表达上调,在15、16、17、18号蛋白质点的表达下调。6.分别从上述三个组的2-DE凝胶图谱中,各选取6个蛋白质表达活性差异在3倍以上的蛋白质斑点,共计18个,上机进行MALDI-TOF-MS分析,鉴定出10个差异表达蛋白质。结果显示：气虚证组和健康组比较,气虚证组有1个未知蛋白质表达；表达上调的蛋白质有核内不均一核糖核蛋白,表达下调的蛋白质有核仁磷酸B23、hPOT1蛋白；湿热证组与健康组比较表达下调的蛋白质有丝氨酸／苏氨酸特异蛋白激酶,表达上调的有腺苷酰环化酶联合蛋白-1,而硫氧还原蛋白过氧化物酶、抗增殖蛋白则无表达,健康组的相关差异表达蛋白质活性水平则正好分别与两组相反。对比气虚证组与湿热证组差异蛋白质点的表达情况,可见气虚证组表达下调的蛋白质有RhoGDP解离抑制蛋白、Ras抑制蛋白,表达上调的蛋白质有受体相关蛋白／RNA聚合酶相关蛋白；湿热证组差异蛋白质的活性水平正好与之相反。结论1.鼻咽癌前病变证候、证素、证型调查表具备较好的信度与效度,可以基本达到中医四诊信息采集规范化的目的。2.在规范采集四诊信息的基础上,运用证素计量辨证法可以较好的指导鼻咽癌前病变的临床辨证,也有利于对其相关证型本质展开规范研究,通过证型本质研究,发现并补充一些关联性强,特异度高的微观检测指标,对于鼻咽癌前病变的临床辨证,具有重要而现实的意义。3.鼻咽癌前病变临床证型以气虚证为主,提示气虚是中医药干预鼻咽癌前病变需重点关注的病理环节。4.在气虚证、湿热证、健康人三组别对比体系中,分别存在不同的差异表达蛋白质特性。5.在质谱分析基础上,联系相关差异表达蛋白质的功能,推测气虚证组调控rRNA转录活性的相关蛋白表达下调,可能与淋巴细胞免疫活性受到抑制,整体免疫机能下降有关,相较湿热证组而言,其可能面临更高的癌变风险。6.受限于病例数量及相关差异表达蛋白功能特性尚未完全阐明,它们与相关证型的关联性尚不能明确,有待在后续研究中进一步探讨。