背景:紫斑牡丹Paeonia rockii(S.G.Haw&Lauener)T.Hong&J.J.Li为毛莨科(Ranunculaceae)芍药属(Peaonia)牡丹组多年生落叶灌木,它一般生长在1100-2800m高的海拔地区,其大多生长在甘肃,青海,山东,西藏,河南和四川西南部等地。其已被列为三级国家珍稀濒危重点保护植物之一,于《甘肃省中药材标准》、《中国植物志》中均有收载。牡丹是中国的百花之王,其不仅仅具有观赏价值,而且具有多种药理活性,从而广泛在中药和民族药中使用。丹皮就是牡丹的根皮,其具有清热凉血,活血化瘀的功效。文献研究还显示,牡丹叶提取物具有抗氧化作用,抗菌活性,降血脂和血管活化等药理活性,可用于妇科疾病和心血管疾病的治疗。但目前对紫斑牡丹的药理作用机制研究甚少,关于其抗氧化成分和抑菌活性研究尚未见报道。目的:本研究的目的是考察紫斑牡丹花、叶的抗氧化作用和抗菌活性,鉴定其抗氧化活性成分及筛选紫斑牡丹花、叶的抗菌作用活性成分,检测紫斑牡丹花、叶的潜在抗氧化成分及预测抗菌作用靶点,探讨潜在抗氧化成分及抗菌作用机制。方法与结果:1.采用Folin-Ciocalteu法和硝酸铝-亚硝酸钠比色法测定紫斑牡丹花、叶中的总酚酸、总黄酮的含量,通过清除DPPH自由基、ABTS自由基、还原能力及金属离子螯合能力的实验来测定紫斑牡丹花、叶提取物的体外抗氧化活性。实验结果表明,紫斑牡丹花、叶提取物含有丰富的总黄酮、总酚酸成分,体外抗氧化实验数据显示其具有较强的抗氧化能力,在清除DPPH、ABTS和还原能力方面更为显著,其体外抗氧化活性均高于阳性对照组(抗坏血酸)。2.采用D-半乳糖损伤小鼠模型进行紫斑牡丹花提取液的体内抗氧化活性的测定,通过8-iso PGF2α、SOD、MDA、GSH和蛋白羰基作为生化指标测定其抗氧化活性。结果显示紫斑牡丹花提取液对8-iso PGF2α和蛋白羰基水平的调控具有明显下降(P<0.01),SOD水平的调控具有一定上升(P<0.05),表明紫斑牡丹花提取物具有一定的体内抗氧化作用。3.通过DPPH-UHPLC-ESI-HRMS~n柱前反应快速鉴定分析紫斑牡丹花、叶中抗氧化成分,结果鉴定了25个潜在的抗氧化成分,其中18个是已鉴定的成分(包括11个黄酮类,4个酚酸类,2个单宁类和1个单萜糖苷类),推断其主要抗氧化有效成分为黄酮、酚酸和单宁类。4.采用微量稀释法和活菌计数法分别测定不同溶剂提取的紫斑牡丹花、叶提取物对七种菌种的最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),测定结果显示,紫斑牡丹花、叶提取物具有一定的抗菌活性,最小抑菌浓度为(MIC):甲醇提取(花)<甲醇提取(叶)<乙酸乙酯提取(花、叶),甲醇提取物对表皮葡萄球菌抑制效果最好,乙酸乙酯提取物对金黄色葡萄球菌抑制效果更佳。5.通过网络药理学的方法来预测紫斑牡丹花、叶的抗菌潜在活性成分和作用靶点,以QuickVina 2.0软件进行分子对接。采用Cytoscape 3.5.1软件绘制抗菌潜在活性成分与抗菌作用靶点的网络图。结果表明紫斑牡丹花、叶中筛选得到潜在活性成分29个,抗菌靶点18个,预测其抗菌成分主要是黄酮和酚酸,抗菌机制主要是抑制细菌蛋白的合成。结论:通过本研究的检测,发现紫斑牡丹花、叶具有很好的抗氧化活性和抗菌活性,为开发新的天然抗氧化剂和抗菌剂提供新的思路与线索。