葡聚糖-聚己内酯囊泡阿尔茨海默症多药联合治疗体系

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复杂的神经病理学使阿尔茨海默症(AD)的临床治疗停滞不前,在发现根源性致病机理之前,针对症状的多药联合治疗策略被认为是改善患者病情的最有效方法。鉴于此,本文精心设计用于实现多药联合递送的纳米载体,分别从提高药物富集和探索多种药物间的协同作用出发进行系统性研究。研究内容如下:(1)以聚己内酯-2-溴异丁酸2-羟乙酯(PCL-HEBIB)、葡聚糖-丙烯酰氯(Dex-AC)和甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为共聚单体,Alanine-Alanine-Asparagine-Cysteine-Lysine(AK多肽)和2-氰基-6-氨基苯并噻唑(CABT)作为靶头,精心设计并成功制备了PCL-Dex-PGMA-AK和PCL-Dex-PGMA-CABT聚合物。1H-NMR测试验证了单体和聚合物的结构;动态光散射(DLS)和透射电子显微镜(TEM)检测表明,上述两种聚合物在水中自组装分别形成响应囊泡(VesicleAK)和伴侣囊泡(VesicleCABT),并且在天冬酰胺内肽酶(AEP)的作用下发生交联反应,形成微米级复合纳米粒子;以罗丹明B为模型药物,通过激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)和流式细胞仪观察到该智能囊泡能够经细胞的胞吞作用运载到细胞质内并大量留存;莫里斯水迷宫实验揭示了经由智能载体介导的联合治疗方案能够有效改善快速老化(SAMP8)小鼠的记忆能力;通过分子生物学检测验证了联合治疗方案能够修复糖代谢异常,降低活性氧含量,改善突触功能;通过离体组织成像和液相色谱-质谱(LC-MS)验证了智能载体能够实现药物的脑内富集。(2)以PCL-HEBIB和Dex-AC为聚合单体,通过ATRP聚合反应合成了两亲性聚合物(PCL-g-Dex)。1H-NMR测试验证了单体和聚合物的结构;DLS和TEM研究表明PCL-g-Dex能够形成纳米囊泡;利用胰岛素抵抗诱导剂建立细胞损伤模型,通过CLSM和流式细胞仪验证了以此载体作为基础精心设计的不同联合治疗方案的治疗效果;以胰岛素,瑞格列奈和盐酸二甲双胍载药囊泡组成的联合治疗方案能够逆转SAMP8小鼠记忆能力的损伤,以外源胰岛素为主药和修复神经传递功能佐剂的载药囊泡的联合治疗方案也取得了成功,上述方案内的药物间具有协同效应,该协同效应可连续刺激相关的生物信号,维持糖代谢和能量循环的稳定,改善突触可塑性并确保神经元间畅通的信号交流。
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