蚯蚓抗菌肽提取纯化及其性质研究

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本实验以蚯蚓为原料,采用大肠杆菌诱导,通过电击的方式对抗菌肽的提取进行了探索和研究,结果表明:直接电击提取的蚯蚓液对大肠杆菌的抑菌圈直径19.7mm,效果最好;大肠杆菌诱导3h、4h、5h、6h的蚯蚓液对大肠杆菌的抑菌圈直径分别为18.00mm、15.33mm、17.33mm、0mm,有随诱导时间延长抑菌效果逐渐降低的趋势;直接提取液、大肠杆菌诱导3h、4h、5h、6h的蚯蚓液对黄曲霉的抑菌圈直径分别为16.00mm、14.00mm、13.00mm、12.00mm、10.00mm,以直接电击提取液的抑菌效果最好,也呈随诱导时间延长抑菌效果逐渐降低的趋势;本次提取液对大肠杆菌抑菌圈直径明显大于国内相关报道(大肠杆菌的抑菌圈19.7mm:11.00mm、0mm、5.2~6mm),且发现了蚯蚓提取液对黄曲霉有明显的抑菌作用(国内尚无报道);蚯蚓提取液对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌无抑菌作用;提取的粗液经Sephadex G-100层析提纯后对黄曲霉的抑菌作用降低(抑菌圈直径16mm:12 mm);对大肠杆菌没有抑菌作用(抑菌圈直径19.7mm:0mm);将蚯蚓提取物用SDS-PAGE电泳测出其蛋白质分子量主要在14.4~20.0KDa范围内,其中一条带的分子量在14.4KDa以下,说明该提取提取物为多肽。从而,认为采用大肠杆菌诱导,通过电击的方式可以提取具有抗黄曲霉和大肠杆菌的多肽,为利用蚯蚓提取抗菌肽粗液提供了一个成功的方法;发现了采用这种方法提取的蚯蚓液有很好的抗黄曲霉的作用,为解决黄曲霉对饲料污染与其对畜牧业的危害问题提供了一个新的线索;通过层析分离提纯会导致提取液抑菌效果的降低和消失,其方法还需进一步改进。
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