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1．慢性化脓性中耳炎鼓室硬化豚鼠动物模型的建立 研究建立慢性化脓性中耳炎鼓室硬化动物模型豚鼠的方法，为慢性化脓性中耳炎鼓室硬化的动物实验研究提供一种有用的动物模型。采用小鼠腹腔连续传代3次增强毒力的金黄色葡萄球菌制备豚鼠化脓性中耳炎动物模型，了解化脓性性中耳炎对听阈的影响及是否导致鼓室硬化。将钙化斑及局部骨化作为鼓室硬化的标志，接种细菌后一周就可观察到中耳粘连的出现，接种后2周出现钙化斑等鼓室硬化灶，听力较对照耳明显下降。观察到硬化灶最常见的部分是下鼓室，其次是鼓室上隐窝、上鼓室、鼓膜、听骨链间隙和咽鼓管鼓口。其病理变化与人化脓性中耳炎鼓室硬化类似，是研究人化脓性中耳炎鼓室硬化较好的动物模型。 2．BMP在正常豚鼠中耳粘膜的表达及定位 了解骨形成蛋白在正常豚鼠中耳粘膜的表达定位，为研究BMP在慢性中耳炎炎症转归中的作用提供实验数据。用BMP单克隆抗体免疫组化染第，军医大套硕士李位伦义色对正常豚鼠中耳粘膜组织BMP的表达进行了定性分析。BMP在豚鼠中耳粘膜靠近骨壁处以及鼓室内侧壁小血管的细胞中呈阳性表达。正常豚鼠中耳粘膜组织中存在少量BMP表达，可能在中耳的发育中起着一定的作用。3.骨形成蛋白与纤维粘连蛋白在慢性化脓性中耳炎豚鼠中耳粘膜的表达 利用免疫组化ABC方法观察骨形成蛋白(B one morphogenetic Proteln，BMP)与纤维粘连蛋白任ib~ctin，FN)在豚鼠化脓性中耳炎中耳粘膜的表达及定位，为研究BMP、FN在慢性中耳炎炎症转归及在鼓室硬化中的作用提供实验依据。将25只豚鼠麻醉后，在无菌条件下于右耳经鼓膜注射1x 10soL一’的金葡菌液loopL，左耳作正常对照，制成慢性化脓性中耳炎模型，45d后用BMP、FN单克隆抗体免疫组化染色对炎症中耳粘膜BMP与FN的表达进行分析。中耳粘膜实验组(n二25)和对照组(n=25)BMP阳性细胞数分别为39.04士5.34和9. 24士1.83，用SPSS软件配对t检验，t=27.16只0.01。中耳粘膜实验组(n=25)和对照组(n=25)FN阳性细胞数分别为49.73士8.65和13.73士6.99。用SPSS软件配对t检验，t=12.09只0.01。说明两组间的阳性细胞数有差别。慢性炎症作用下中耳粘膜BMP与FN表达较正常粘膜明显增强。实验证实BMP与FN在化脓性中耳炎时参与中耳粘膜的炎症反应，并可能对中耳炎引起的中耳粘连以及鼓室硬化的发生有一定作用。4.骨形成蛋白、纤维连接蛋白在人类慢性化脓性中耳炎中耳粘膜的表达 利用免疫组化ABC方法观察骨形成蛋白(Bone mo印hogenetie protein，BMP)与纤维粘连蛋白(Fibronectin，FN)在人类化脓性中耳炎中耳粘膜的表达及定位，为研究BMP、FN在慢性中耳炎炎症转归及在鼓室硬化中的作用提供实验依据。利用取自我科2003年4月~2004年元月，住院行乳突根治术的23例患者中耳粘膜标本，正常对照标本取自同期的9例外伤性周围性面神经麻痹的行面神经探查减压的患者。用BMP、FN单克隆抗体免第四军医大母硕士李位论我疫组化染色对炎症中耳粘膜BMP与FN的表达进行分析。中耳粘膜实验组 (n=23)和对照组(n=9)BMP阳性细胞数分别为56.28士10.85和12.40士4.06，用SPSS软件t检验，t二23.35只0.01。中耳粘膜实验组(n=23)和对照组(n=9)FN阳性细胞数分别为51.92士7.64和12.36士3.75。用SPSS软件t检验，t=22.68只0.01。说明两组间的阳性细胞数有差别。同时正常人类中耳粘膜有BMP及FN的阳性表达。实验证实BMP与FN在化脓性中耳炎时参与中耳粘膜的炎症反应，并可能对中耳炎引起的中耳粘连以及鼓室硬化的发生有一定作用。