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第一部分目的:探讨成年大鼠不同程度创伤性脑损伤(TBI)后损伤区周围皮层与海马区内源性神经发生的情况,为下步实验研究选定TBI模型。方法:1.SD大鼠随机分为假手术(sham)组、轻度TBI(miTBI)组、中度TBI(moTBI)组和重度TBI(sTBI)组,sham组大鼠只开骨窗,不制备TBI模型;三个不同程度的TBI组通过调控电子皮层撞击损伤仪(eCCI)的参数来制备不同程度的TBI模型。2.TBI后立即行头颅核磁检查各组大鼠脑水肿情况。3.SD大鼠TBI后连续5天腹腔注射BrdU以标记新生eNSCs。4.TBI后第7天应用免疫组化法检测损伤区周围皮层与损伤侧海马区BrdU+新生eNSCs。结果:1.各组SD大鼠头颅相近层面损伤区的水肿面积,为miTBI组小于mo TBI组,moTBI组小于sTBI组,而sham组无水肿。2.损伤区周围皮层与海马区BrdU+新生eNSCs的计数结果,为sTBI组多于moTBI组,miTBI组少于moTBI组,而sham组则极少。结论:在一定程度内TBI的损伤程度越大,损伤区周围皮层与海马区的新生eNSCs的数量就越多,也为下一步实验提供了合适的TBI模型。第二部分目的:探讨不同时程亚低温对成年大鼠TBI后内源性神经发生的影响。方法:1.SD大鼠随机分为假手术组(sham组)和sTBI组,下面统称TBI组(包括常温(NT)组、3小时亚低温治疗(3hTH)组、6小时亚低温治疗(6hTH)组和10小时亚低温治疗(10hTH)组),sham组大鼠只开骨窗,不制备TBI模型。TBI组大鼠采用eCCI装置制备TBI模型。模型制备完毕后,NT组大鼠置于室温环境下,亚低温组大鼠在麻醉状态下置于冰毯上,维持肛温在33?C左右,分别给予3小时、6小时和10小时的亚低温治疗。2.SD大鼠TBI后连续5天腹腔注射BrdU以标记新生eNSCs。3.TBI后第7天应用免疫荧光法检测损伤区周围皮层与损伤侧海马区Brd U+/DCX+新生未成熟的神经元,BrdU+/NeuN+新生成熟的神经元,及损伤侧皮层BrdU+/GFAP+新生星形胶质细胞。4.TBI后24小时和TBI后2月,对同一批大鼠在同样条件下,行mNSS评分进行评估。结果:1.BrdU+/DCX+未成熟的新生神经元,10hTH组最多,6hTH组次之,3hTH组少于6hTH组,NT组少于3hTH组,sham组皮层几乎无阳性结果,海马区有极少的阳性细胞,差异有统计学意义。2.BrdU+/NeuN+未成熟的新生神经元,10hTH组最多,6hTH组次之,3hTH组少于6hTH组,NT组少于3hTH组,sham组皮层无阳性细胞,海马区则少于NT组,差异有统计学意义。3.BrdU+/GFAP+新生星形胶质细胞,sham组最少,10hTH组多于sham组,6hTH组多于10hTH组,3hTH组多于6hTH组,NT组最多,差异有统计学意义。4.mNSS评分结果:3hTH组、6hTH组、10hTH组在TBI后24小时和2月各组的组间比较,TBI后2月的mNSS评分低于TBI后24小时,差异有统计学意义;TBI后2月10hTH组mNSS评分低于NT组,差异有统计学意义。结论:亚低温治疗可以促进TBI后内源性神经发生并更多的向神经元分化,时程越长越明显;长时程亚低温可以更好的促进TBI后的神经功能恢复。