microRNA的发现对癌症的诊断和治疗打开了一扇新的希望之门。microRNA是一类内源性的小RNA分子,通常为19-24核苷酸长,它们可以通过非完全配对的机制抑制靶基因的翻译,甚至导致靶基因的降解。在众多的关于microRNA的实验研究中,研究者们发现microRNA在各种肿瘤中通常都发生差异性的变化,并且发现microRNA与许多肿瘤的临床病理特性及肿瘤的预后都有相关性,说明microRNA在肿瘤的发生过程中起着重要的作用。(一) microRNA在神经母细胞瘤(neuroblastoma)中的表达谱,以及潜在的功能研究还不多。Ray Stalling小组从18例神经母细胞瘤标本中发现157种microRNA的表达。Afanasyeva等从神经母细胞瘤中克隆出29种新的microRNA。另外还一些报道发现一些microRNA与神经母细胞瘤发生的风险因子MYCN,1p36,llq LOH有关。然而,与神经母细胞瘤转移相关的microRNA还没有文献报道。在本课题研究中,我们建立了神经母细胞瘤的转移瘤的荷瘤鼠模型,采用microRNA生物芯片方法,通过比较转移性肿瘤组织与原位肿瘤组织中microRNA的表达水平的差异,得出在神经母细胞瘤转移进程中可能起作用的microRNA,并且使用real time RT-PCR实验方法验证了生物芯片的准确性。实验结果显示,54个microRNA的表达水平在肿瘤发生转移的过程中发生了显著的变化。另外我们还结合生物信息学手段和相关文献报道,预测了这些显著变化的microRNA可能的靶基因。这些实验结果说明这一类差异显著变化microRNA在神经母细胞转移的进程中,起到十分重要的作用。(二)目前关于骨肉瘤肿瘤组织中microRNA表达谱的还未见报道,研究骨肉瘤肿瘤组织中microRNA表达谱,可以全面的探究骨肉瘤中异常变化的microRNA,从而可以为研究microRNA在骨肉瘤发生发展中的作用提供指导性作用。本课题从2008至今与南京军区总院骨科合作,共收集了53例骨肉瘤肿瘤组织标本,采用microRNA生物芯片的方法,研究了骨肉瘤肿瘤组织的microRNA表达谱,发现22个microRNA在肿瘤组织中上调表达,41个microRNA下调表达。并且使用qRT-PCR的方法验证了这些差异变化的microRNA。并且在细胞水平研究了has-miR-199a-5p对骨肉瘤细胞系MG-63的增殖、凋亡、分化与迁移的影响,发现过表达has-miR-199a-5p可以抑制肿瘤细胞的增殖和迁移,促进肿瘤细胞的分化。提示has-miR-199a-5p可能作为骨肉瘤治疗的一个靶基因。