蓝狐兔脑炎微孢子虫病PCR诊断方法的建立及初步应用

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微孢子虫是一种专性细胞内寄生的、可形成孢子的真核病原菌。在自然界中普遍分布,具有广泛的宿主,可以侵染无脊椎动物到脊椎动物几乎所有生物,甚至人类。微孢子虫主要通过食物和水进行传播,并引发微孢子虫病,是一类能够引起人类发病的人畜共患寄生虫病。我国已经成为毛皮动物养殖与裘皮加工大国,且产业发展具有强大势头,我国居民对蓝狐、水貂等“黄金裘皮”的需求不断增加,促使该产业成为我国特种经济动物养殖业的重要组成部分。吉林省作为毛皮动物养殖的主产区,发展历史悠久,早在1956年,便由国家牵头在吉林省的左家镇建立了我国第一批毛皮动物养殖场,目前主要的养殖区域是白城市和松原市。蓝狐皮因其具有很高的经济价值而备受养殖者青睐,蓝狐皮优质柔软、轻便耐磨、美观保暖,是制作上等裘皮大衣的高等原材料。兔脑炎微孢子虫(Encephalitozoon cuniculi)属于微孢子虫中的脑炎微孢子虫属,现已证明引起蓝狐微孢子虫病的病原体为兔脑炎微孢子虫,由于该病隐性感染率较高,给人和动物的健康带来极大隐患。因此,快速有效的诊断方法对于预防和治疗该病具有重要意义。为建立一种快速、特异、灵敏的检测兔脑炎微孢子虫(Encephalitozoon cuniculi)的方法,针对微孢子虫特有的侵染结构极管上的保守基因极管蛋白4(PTP4)设计了1对特异性引物,建立并优化了能快速检测兔脑炎微孢子虫的PCR检测方法,对该方法进行特异性试验、敏感性试验检测。并用所建立的方法对50份临床样品进行了检测。特异性和敏感性试验结果显示,该PCR诊断方法只对兔脑炎微孢子虫敏感,对其他微孢子虫均不敏感。临床检测结果显示,同时对50份临床样品进行检测,检出率为100%,提示蓝狐群存在兔脑炎微孢子虫感染。本研究建立的PCR方法适用于狐源兔脑炎微孢子虫的临床检测。
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