本研究首先对IBV S1、IBDV VP2基因进行亚克隆,并利用一段linker将IBV S1、IBDV VP2基因连接后,利用真核表达载体pVAX-1,通过基因重组分别构建真核重组表达质粒pVAX-IBV S1、pVAX-IBDV VP2和pVAX-IBV S1-linker-IBDV VP2。体外瞬时转染实验表明,外源基因能够在细胞内进行表达,并且表达后的蛋白可以被相应的IBV S1多克隆抗体和IBDV VP2多克隆抗体识别,说明了插入的外源基因具备各自的免疫反应性,为动物体内试验提供了基础。将试验鸡分为8组,即S1组(免疫pVAX-IBV S1真核重组质粒)、VP2组(免疫pVAX-IBDV VP2真核重组质粒)、SV组(免疫pVAX-IBV S1-linker-IBDV VP2真核重组质粒)、SV18组(免疫pVAX-IBV S1真核重组质粒和pVAX-ChIL-18真核重组质粒)、18组(免疫pVAX-ChIL-18真核重组质粒)、YM组(免疫IBVH120疫苗和IBDV疫苗)、PBS组(免疫PBS)、pVAX组(免疫pVAX空载体质粒)。免疫过程中利用淋巴细胞增殖试验、酶联免疫吸附试验、中和抗体试验以及利用流式细胞术检测CD4+、CD8+T淋巴细胞动态变化,对不同日龄的试验动物进行检测,最后用病毒攻击试验比较免疫不同质粒组别之间保护率。实验结果表明,二联核酸疫苗对两种病毒的攻击有一定的保护作用,添加了ChIL-18作为免疫佐剂增强了二联核酸疫苗的免疫效果,同时增加了核酸疫苗对病毒攻击的保护力。