Bcl-2和核受体Nur77介导的凋亡/线粒体自噬的机制研究

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Nur77(也叫TR3和NGFIB)是核受体超家族的重要成员的之一,在调控肿瘤细胞的生存与凋亡中起着双重作用,是抗肿瘤药物开发的重要靶点。Bcl-2家族蛋白成员在肿瘤的发生、转移和耐药中均发挥着关键性的调控作用,是目前肿瘤靶向药物开发的另一个热点。我们课题组前期报道了 Nur77通过转运到线粒体,与Bcl-2相互作用,使得Bcl-2构象改变,使其从保护细胞的功能转为细胞杀手。我们课题组近期也报道了一个新的依赖于Nur77的线粒体自噬机制:雷公藤红素能够促使Nur77出核至因持续炎症刺激引起的损伤线粒体上,通过与TRAF2相互作用诱导Nur77的泛素化,从而与自噬适配器蛋白p62相互作用后诱导线粒体自噬,清除损伤线粒体,进而缓解炎症及相关疾病。综上,Nur77具有调控凋亡与自噬的双重功能。但是,直接与Nur77结合,诱导其线粒体定位和Bcl-2相互作用的小分子还没有被发现,Bcl-2足否参与雷公藤红素诱导的依赖于Nur77和p62的线粒体自噬还不清楚。本论文研究发现 DIM-C-pPhCF3+McSO3-(BH071)是一个 Nur77-Bcl-2 凋亡通路的新型调节剂。BI1071与Nur77高亲和力结合,促进Nur77向线粒体转位,与Bcl-2相互作用,有效诱导癌细胞凋亡。动物模型研究表明BI1071通过诱导肿瘤细胞凋亡而有效抑制肿瘤细胞的生长。本论文研究进一步发现Bcl-2通过与p62相互作用,破坏雷公藤红素诱导的Nur77和p62在线粒体上的相互作用和招募Ub与LC3,从而抑制雷公藤红素诱导的线粒体自噬。而将内源的促生存的Bcl-2敲除后,能促进雷公藤红素诱导的线粒体自噬。并且,Bcl-2通过与p62相互作用并诱导p62切割,发挥其抑制线粒体自噬的功能。并且,进一步发现BI1071能促进Nur77,Bcl-2和p62在线粒体上相互作用促进自噬性凋亡。雷公藤红素与BI1071或Bcl-2抑制剂联合用药时,二者的促凋亡作用相对单独用药时有非常大的提升,这与Nur77和Bcl-2在其中的功能转换具有密切关系。综上所述,本论文研究结果表明BI1071有望成为治疗Nur77和Bcl-2过表达的肿瘤的一种有潜力的先导化合物。本论文进一步阐述Nur77和Bcl-2在调控自噬和凋亡之间的作用转换,为以Nur77为靶点的抗肿瘤药物开发和联合用药提供了理论基础,为后续靶向药物的开发提供可行的先导化合物,为Bcl-2抑制剂的联合用药开发提供了新的方向。本论文的研究对推动BI1071,雷公藤红素和Bcl-2抑制剂成为安全有效的新兴药物研发具有重大应用价值和现实意义。
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