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Opaque2 (02)是一个在玉米(Zea mays)籽粒发育过程中起到重要作用的bZIP类转录因子。已有研究表明02可以广泛参与籽粒发育过程并且主要调控籽粒中含量最大的储藏蛋白——醇溶蛋白。02蛋白可以和多个转录调控因子以及细胞骨架蛋白发生蛋白互作,并且影响其生物学功能。本研究开展了一个新的02互作蛋白ZmMADS47的生物学功能分析。前期研究利用酵母双杂筛选,获得了多个02可能的互作蛋白,其中包括一个MADS类转录因子ZmMADS47。本研究中,我们首先利用体内和体外的蛋白互作实验,包括免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)以及GST Pull-down实验等,验证了ZmMADS47与02的互作。基因表达分析发现ZmMADS47可以在多种组织中表达。基因序列进化树分析表明ZmMADS47与水稻中的OsMADS47同源。对ZmMADS47的转录因子特征,包括细胞核定位以及转录激活能力的检测发现,ZmMADS47的N端与全长具有核定位信号；其C端具有显著的转录激活能力,但全长蛋白转录激活能力较低。通过玉米转基因,获得了显著抑制ZmMADS47表达的转基因RNAi材料。对RNAi转基因籽粒的RNA-seq、透射电镜以及生化成分分析表明,抑制ZmMADS47表达造成a-zein和50-kD γ-zein在15DAP的表达量下降,部分蛋白体显著变小并且畸形。体外系列的DNA-蛋白互作实验确认ZmMADS47直接结合在α-zein和：50-kD γ-zein启动子的CATGT序列。洋葱表皮细胞的瞬时转录激活实验确认ZmMADS47单独不能激活目标启动子的转录,而在和02互作后可以不同程度的增强对目标启动子的转录。对02蛋白转录激活结构域的缺失突变、50-kD γ-zein启动子CATGT基序的缺失突变以及ZmMADS47的C端7个氨基酸的缺失分析提示,02在和ZmMADS47蛋白互作后,可能改变ZmMADS47的构象,从而释放出ZmMADS47 C端转录激活结构域的转录激活能力。通过本研究,确定了一个新的02蛋白互作蛋白ZmMADS47,并且通过对ZmMADS47的生物学功能的研究,发现它是一个新的醇溶蛋白基因转录因子,并且以一种互作激活的新的机制实施其功能。本研究的结果拓展了我们对醇溶蛋白基因转录调控的认识。