我室从1982年以来一直从事肝癌导向治疗的研究，曾成功地制备并高效表达了抗肝癌单链抗体m／hscFv₂₅，与人天然型TNF-α连接后，先后进行了原核、真核表达及导向治疗研究，取得了一定的治疗效果。但由于天然型TNF-α的毒副作用很大，在临床应用中常出现发热、寒战、恶心、呕吐等症状，严重者甚至出现全身消瘦，导致各脏器衰竭而死亡，大大限制了它在临床上的应用，因此我们尝试用高生物学活性、低毒性的突变型TNF-α（mTNF-α）将之替代，构建新型、高效、低毒的抗肝癌双功能抗体原核表达载体pGEX4T-1／scFv₂₅-mTNF-α，通过诱导表达、纯化后，对SMMC-7721肝癌细胞及荷肝癌裸鼠进行导向治疗研究，以期制备出具有临床应用潜能的抗肝癌双功能抗体，为今后肝癌的临床导向治疗研究打下基础。 一 m／h scFv₂₅-mTNF-α的构建、表达 采用PCR的方法在mTNF-α的两端加上所需要的酶切位点，将之连接在m／hscFv₂₅的3’端，构建原核表达载体pGEX4T-1 m／hscFv₂₅-mTNF-α，