格尔德霉素对DAPK的调节在脑缺血再灌注中的保护作用机制研究

来源 :徐州医学院 徐州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:handy1989
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:目前的研究结果表明,细胞内死亡相关蛋白激酶(death associatedprotein kinase,DAPK)的调节主要体现在两个层次:基因的表达和酶的活性调节。死亡信号引起的Smad蛋白和抑癌蛋白p53的激活可以增强DAPK基因的表达。DAPK的酶活性主要受磷酸化/去磷酸化的调节,但调节机制不止一种。DAPK的激活机制主要有Ca2+/钙调素依赖的磷酸酶导致的308位的丝氨酸去磷酸化,胞外信号调节激酶(ERK)导致的735位的丝氨酸磷酸化,以及酪氨酸蛋白激酶(Src)和磷酸酶(LAR)调节的491和492位酪氨酸的磷酸化等。在全脑和局灶脑缺血中发现,DAPK可以通过NMDA受体的过度激活,引起Ca2+内流,激活钙调神经磷酸酶(CaN),使DAPK去磷酸化而激活[20]。可见,对于DAPK在不同生理条件下活性的调节是个复杂问题,需更进一步的研究。为此,我们研究了在脑缺血/再灌注中格尔德霉素(GA)对DAPK的调节作用。  方法:采用四动脉结扎法来构建SD大鼠全脑缺血模型,脑室注射法给药,脑室注射格尔德霉素GA(800μM/lOul),蛋白酶体抑制剂MG132(20μg/5μl)和DMSO(20%)。运用Western Blot检测DAPK在脑缺血再灌注中表达量和磷酸化水平变化,用免疫沉淀IP检测脑室注射GA和MG132后DAPK和HSP90、caspase-8结合的表达和活性的变化情况。用焦油紫染色的方法检测脑缺血再灌注中的大鼠海马CA1区神经元的存活和凋亡。  结果:GA引起脑缺血再灌注6小时DAPK表达量的降低,引起缺血复灌6小时DAPK磷酸化水平的升高。GA能够引起脑缺血再灌注中DAPK-HSP90结合水平的降低,蛋白酶体抑制剂MG132抑制了GA引起的DAPK表达水平的下降。我们实验得出GA能够引起DAPK-Fas结合的降低,GA能够引起caspase-8的表达降低,而MG132抑制了这种作用。  结论:GA降低了脑缺血再灌注海马CA1区DAPK的表达水平;GA通过抑制DAPK与HSP90的相互结合,引起DAPK的蛋白酶体降解;GA降低了脑缺血再灌注中DAPK的激活;GA降低了DAPK-Fas相互作用及下游caspase-8的活化;GA对脑缺血再灌注造成的海马CA1区神经元损伤有保护作用。
其他文献
2010年上海市区甲状腺癌发病率 男性10.32/10万第十位 女性29.55/10万第四位 外科手术范围的选择 国内外趋向一致的观点 一、全甲状腺切除或近全切除的手术指征
会议
随着工业产业的迅速发展,其所带来的环境问题也日益严重,其中重金属离子和有毒阴离子的污染备受人们关注。因此,对它们识别检测的研究也受到了各个领域科学家的关注,而化学传感器以其结构简单、检测迅速方便和灵敏度高等优点,更是受到化学家们的关注。本论文主要研究了希夫碱及腙的离子传感器的合成方法和性能,内容分为以下三个部分:在第一部分中,简要介绍了离子识别的背景知识和研究意义,分别阐述了近年来(i)铜离子识别
会议
目的:本实验室前期结果表明,脑缺血可促进由Src家族酪氨酸蛋白激酶(Srcfamily protein tyrosine kinases;SrcPTKs)介导的PSD-95(postsynaptic density protein95)的酪氨酸磷酸化
  A new surface temperature measurement using infrared detector Qingsheng Xie,Wei Liu,Hanbing Leng,Bo Yi,Zefeng Wang,Yaohong Chen Xi'an Institute of Optics an
会议
会议