本文运用数字差异显示方法克隆了一个新的人类睾丸特异性表达基因HMGB4。序列分析表明,HMGB4是HMGB家族的一个新成员,与其他三个HMGB家族成员不同的是HMGB4缺乏其家族共同具有的酸性尾部。Northern blot分析显示只有一个0.7 kb大小的HMGB4转录本并且只在成人睾丸中表达,而其他7个组织没有检测到表达。Western blot分析也显示,HMGB4强烈地在成人睾丸中表达,而其他6个组织没有检测到表达。
　　通过原位杂交和免疫组化分析显示HMGB4是一个生殖细胞特异性表达基因,HMGB4在精母细胞,精子细胞,精子和精原细胞瘤细胞中强烈表达,在支持细胞和间质细胞中没有表达;在正常成年人及精原细胞瘤或隐睾症患者的睾丸中检测到阳性信号,没有在唯支持细胞综合征患者的睾丸中的检测到任何信号。转染pEGFP-N3-HMGB4至GC-1和HeLa细胞24h以后,产生的绿色荧光位于GC-1和HeLa细胞的细胞核中。15个人体细胞系的半定量RT-PCR显示HMGB4在NT-2,HBL100细胞中高度表达,在MDA-MB468, MCF7, T47D, A549, HepG2, HepG3B, Hela细胞中相对低地表达,而在SK-MES-1, NCI-H460, MDA-MB453, SW480, HF-29, HEK293细胞中没有表达;HMGB4可能与癌症有关。流式细胞术分析细胞周期表明,在GC-1和HeLa细胞中过表达HMGB4显著阻滞了细胞从G1期进入S期。HMGB4可以大幅降低荧光素酶基因的转录,HMGB4是一个潜在的转录抑制子。总之,HMGB4强烈、优先地在成年睾丸组织表达,它可能在睾丸发育和精子发生的过程中起到重要作用。