缺血后处理对小肠缺血/再灌注损伤保护作用的实验研究

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【目的】研究缺血后处理对小肠缺血/再灌注损伤的保护作用,实验分为假手术组(Sham group S)、缺血/再灌注损伤组(ischemia/reperfusion injury I/R)、缺血预处理组(ischemia preconditioning IPC)和缺血后处理组(ischernia postconditioningIPost),从肠粘膜的损伤程度,促炎因子和抗炎因子的释放等不同方面研究后处理对小肠I/R损伤的保护作用,从而为临床防治小肠I/R损伤提供一个新的策略。【方法】SPF级健康SD成年大鼠56只,体重280g-320g,雌雄不拘,随机分为S组、I/R组、IPC组和IPost组(n=14),每组根据再灌注时间分为两个亚组(n=7)。①S组:取腹正中切口,长约3cm,分离肠系膜上动脉(SMA)后关腹;②I/R组:无创微动脉夹夹闭SMA45min后松开动脉夹,分别于再灌注2h,4h时采集标本;③IPC组:在缺血前,给于SMA 3个循环的预处理(缺血2min后再灌注2min为一个循环),余同I/R组;④IPost组:缺血45min后,给于SMA3个循环的后处理(再灌注2min后缺血2min为一个循环),余同I/R组。测小肠湿/干比重(W/D),HE染色观察小肠粘膜损伤程度。ELISA法检测血清中IL-1β,IL-6,IL-10和TNF-a的含量。【结果】1.W/D比重变化:I/R组、IPC组和IPost组再灌注2h后小肠组织W/D较S组明显增加,至4h仍显著高于S组(P<0.05);IPC组和IPost组W/D显著低于I/R组(P<0.05),IPC组和IPost组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。2.小肠粘膜病理变化:S组大鼠肠绒毛完整,排列整齐,无明显出血。I/R组大鼠在再灌注2h和4h后小肠绒毛上皮顶端与固有层分离并见固有层毛细血管暴露、出血和溃疡,粘膜绒毛坏死,脱落。与I/R组相比,IPC组和Ipost组在各时间点肠粘膜绒毛损伤减轻,坏死,脱落少见。IPC组和Ipost组损伤评分明显低于I/R组(P<0.05),IPC组和Ipost组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。3.细胞因子改变:I/R组、IPC组和Ipost组再灌注2h、4h,大鼠动脉血清中炎性细胞因子IL-1β,IL-6,TNF-a含量明显高于S组(P<0.05),IPC组和Ipost组IL-1β,IL-6,TNF-a则低于I/R组(P<0.05),IPC组和Ipost组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。大鼠动脉血清中抗炎因子IL-10含量在I/R组、IPC组和IPost组各时间点明显低于S组(P<0.05),IPC组和IPost组各时间点高于I/R组(P<0.05),IPC组和Ipost相比,差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】(1)IPost和IPC降低小肠I/R损伤后的W/D比,减轻再灌注后组织的水肿程度。(2)IPost和IPC能减轻再灌注后小肠粘膜绒毛的坏死程度、绒毛脱落减少。(3)IPost和IPC能抑制促炎细胞因子(IL-1β,IL-6,TNF-a)的释放和促进抗炎细胞因子IL-10的表达,使体内抗炎反应和促炎反应趋于平衡状态。(4)IPost和IPC在对小肠I/R损伤的保护方面具有相同的效果。
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