甜菜夜蛾核多角体病毒(Spodoptera exigua multiple nucleopolyhedro virus，SeMNPV)是重要的农业害虫甜菜夜蛾的高效特异的病原物。SeMNPV基因组中一个非必需基因——脱皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因(ecdy steroid UDP glucosyltransferase，egt)能使被病毒感染昆虫保持幼虫状态而有利于病毒的增殖。以色列黄蝎的神经毒素基因LqhIT2的产物能引起昆虫慢性、持续性松弛的麻痹。在本研究中，笔者报道了通过同源重组方法和空斑纯化技术，构建了一株表达LqhIT2并缺失了egt的重组SeMNPV。 PCR法扩增得到LqhIT2，并在其起始密码子ATG前插入了SeMNPV的一个极早期基因iel启动子Piel。为了便于筛选重组病毒，将一个报告基因——绿色荧光蛋白基因(green fluorensence protein，gfp)和LqhIT2连接。在重组片段两侧连接egt基因的上下游侧翼序列，得到了以克隆载体pUC18为基础的转移载体pGFP+LqhIT2+。pGFP+LqhIT2+和SeMNPVDNA通过脂质体法共转染甜菜夜蛾培养细胞，72小时后，在荧光显微镜下可以观察到部分被转染的细胞有绿色荧光。利用空斑纯化法分离得到了一株重组病毒，命名为SeV1。REN和PCR分析证明gfp基因和LqhIT2已经成功地整合在SeV1的egt基因位点。将SeV1注射入5龄甜菜夜蛾的血腔，30小时后，幼虫产生典型的麻痹症状；48小时后，产生麻痹症状的虫口达到60％。注射感染生物测定结果表明，SeV1感染目标害虫72小时的杀虫效果是野生型SeMNPV的5倍。但SeV1不具有对甜菜夜蛾幼虫的口服感染毒性，分析可能与SeV1基因组中一段SeMNPVPstⅠ-C6.9kb片段的缺失有关。