DNA与抗癌药物相互作用及DNA凝聚的研究

来源 :中国科学院物理研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chaska
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本文主要介绍以下三个方面的工作:第一,研究了抗癌药物顺铂对DNA单分子结构和力学性质的影响;第二,发现几何限制可导致DNA在云母表面凝聚成toroid,并用布朗动力学做出模拟;第三,证实spermidine使DNA在云母表面形成二维凝聚,凝聚路径不同于溶液中的三维凝聚。论文中工作主要取得了以下有意义的研究进展:   (1)用原子力显微镜(AFM)和磁镊(Magnetic Tweezers)研究了抗癌药物顺铂(cisplatin)对单个DNA分子(single DNA molecule)结构的影响。结果显示:当顺铂浓度比较低时(几十微摩尔),DNA变得柔软,驻留长度(persistence length)从大约52 nm显著缩短到大约15 nm;当顺铂浓度比较高时(几百个微摩尔),DNA表现出凝聚现象。基于AFM成像和单分子操纵两方面的实验结果,我们提出一个模型来解释观察到的DNA凝聚:首先,顺铂的两个活性位点与DNA相邻碱基结合,导致DNA双螺旋局部弯折;接着,由于顺铂对DNA的远程交联,DNA上形成大约20 nm直径的小环;然后,顺铂进一步交联DNA,使其产生较大的聚集;最终,DNA凝聚成为致密的颗粒。作者用同样的方法研究了另一种铂类抗癌药物奥沙利铂(oxaliplatin),发现它对DNA结构的影响与顺铂类似,作者认为“通过远程交联使DNA局部成环”是与顺铂结构类似的铂类抗癌药物共有的重要特征。   (2)作者观察到在不用任何凝聚剂(condensing agent)的情况下,DNA能够在云母片上被压缩成环(compacted into toroid),这种凝聚是由云母片上的小液滴对DNA造成几何限制引起的。通过AFM成像我们发现,在较大的液滴中,DNA分子呈无规卷曲(random coil)或半有序的环状折叠(semi-ordered folded loops),当液滴足够小时,DNA呈现为紧密的、有序的toroid结构(ordered toroids)。为了深入理解这个现象,作者用粗粒化模型进行了布朗动力学模拟(coarse-grainedBrownian dynamics simulation),得到和实验相吻合的结果,并且,还发现toroid的形成不仅对液滴大小十分敏感,DNA的柔性也非常重要。   (3)作者用AFM系统研究了高价阳离子spermidine导致的DNA在云母表面的凝聚现象:DNA围绕着中间的三维核心形成致密的单层图案。作者认为这样的图案是溶液中自由伸展的DNA分子在云母表面的二维凝聚,与溶液中的三维凝聚路径不同。此外还解释了这种情况下难以用AFM观察到toroid的原因,以及溶液中三维凝聚与表面上二维凝聚之间的关系,揭示出DNA在带电表面上二维行为与在溶液中的三维行为有明显差异。
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