人体血清中(1,3)-β-D葡聚糖(βG)的含量测定是临床上侵袭性真菌感染的检测指标。本文克隆了能与βG特异性结合的美洲鲎属G因子α亚基片段a基因(Gαa),代替了天然珍惜鲎血,不用担心资源的枯竭和原料的稳定性。分子量为1251bp,选择pET-15b为表达载体,构建了工程菌BL21-pET-15b-Gαa。原核表达并纯化了Gαa蛋白,质量为43kDa,通过镍柱纯化后,纯度达到95%以上,浓度为2mg/mL。利用了Gαa蛋白与βG特异性结合的特性,探究检测βG含量的3种方法:酶联免疫检测方法、比浊检测方法和碳量子点荧光生物检测方法。模拟双抗夹心法,可以检测到βG浓度下限为20ng/mL,建立了酶联免疫检测的方法。在紫外分光光度计340nm下检测其吸光度与加入βG含量呈正线性相关,线性范围3.125-200μg/mL,R2=0.997,检测限为3.125μg/mL,建立了比浊检测方法。利用Gαa蛋白可以和氨基化修饰碳量子点偶联,构建碳量子点荧光生物“碳点/Gαa蛋白”,检测βG浓度的线性范围为9.375~150pg/mL,最低检测限为9.375pg/mL,批间、批内精密度均小于5%,准确度(回收率)在97%~102%之间,建立了碳量子点荧光生物检测法。这3种方法为未来βG含量的检测提供了新的思路,具有低成本、快速、高灵敏度和特异性。