【摘 要】
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目的:评价虾青素(Astaxanthin,AST)对balb/c小鼠肠缺血再灌注(Intestinal ischemia-reperfusion,II/R)损伤的影响及可能的作用机制。方法:采用随机数字表法将24只7-10周龄、健康雄性balb/c小鼠随机分为3组(n=8):假手术(Sham)组、缺血再灌注(I/R)组、虾青素(AST)组。造模前7天,每日上午9时AST组行虾青素30mg/kg/d
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目的:评价虾青素(Astaxanthin,AST)对balb/c小鼠肠缺血再灌注(Intestinal ischemia-reperfusion,II/R)损伤的影响及可能的作用机制。方法:采用随机数字表法将24只7-10周龄、健康雄性balb/c小鼠随机分为3组(n=8):假手术(Sham)组、缺血再灌注(I/R)组、虾青素(AST)组。造模前7天,每日上午9时AST组行虾青素30mg/kg/d灌胃,Sham组和I/R组行10ml/kg/d橄榄油灌胃。灌胃第7天于给药后40分钟,I/R组和AST组通过夹闭肠系膜上动脉(Superi or mesenteric artery,SMA)45分钟,再灌注2小时的方法建立小鼠肠缺血再灌注损伤模型,Sham组为正常对照组,仅暴露肠系膜上动脉并不进行夹闭。造模成功后经小鼠眼眶静脉采血并行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18的表达。随后处死小鼠,距回盲瓣约5cm处向心端取小肠组织5cm,HE染色观察肠黏膜病理改变并行Chiu,s评分;ELISA法测定肠组织中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)及超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性;Western Blot用于检测肠组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(caspase-1)和削皮素D(gasdermin-D,GSDMD)蛋白的表达。结果:1.相比于Sham组,I/R组中血清炎症因子IL-1β和IL-18水平显著升高(p<0.05);肠黏膜损伤明显、Chiu,s评分明显增加,组间病理特征差异显著(p<0.05);肠组织中MDA含量明显增加,NLRP3、caspase-1和GSDMD蛋白的表达明显上调,而GSH-Px和SOD活性则明显降低(p<0.05)。2.相比于Sham组,AST组中血清炎症因子IL-1β和IL-18水平升高(p<0.05);肠黏膜损伤轻度,Chiu,s评分升高(p<0.05);肠组织中MDA含量增加、GSH-Px和SOD活性降低(p<0.05);此外,NLRP3、caspase-1和GSDMD蛋白的表达在两组之间无明显差异。3.相比于I/R组,AST组中血清促炎因子IL-1β和IL-18的水平明显降低,平均值分别是130.2 pg/m L和99.12 pg/m L,两组间存在显著差异(p<0.05);肠黏膜损伤程度明显减轻,Chiu,s评分也显著降低(p<0.05);肠组织MDA含量降低、GSH-Px和SOD活性升高均较明显(p<0.05);Western blot结果显示NLRP3、caspase-1和GSDMD蛋白的表达显著下调(p<0.05)。结论:虾青素预处理可减轻小鼠II/R损伤,其机制可能与抑制氧化应激,降低细胞焦亡相关蛋白的表达相关。
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