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昆虫利用复杂和敏锐的嗅觉系统在生境中准确识别气味物质、趋利避害,进而完成觅食、产卵、躲避天敌等生理活动。化学感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)能识别寄主植物挥发物和信息素,是昆虫嗅觉系统中不可或缺的一部分。苹果小吉丁虫(Agrilus mali Matsumura)属鞘翅目(Coleoptera)、吉丁虫科(Buprestidae),是一种重要的蛀干害虫。它对我国新疆自治区的天山野果林造成了近乎毁灭性的危害,目前尚无有效的防治措施。因此,从分子生物学和化学生态学方向出发,深入系统性地探究化学感受蛋白的作用机理,对防治苹果小吉丁虫有着重要意义。本文通过分析四条化学感受蛋白基因AmalCSP1、AmalCSP4、AmalCSP5和AmalCSP8的序列和理化性质,及其在雌雄成虫不同组织和部位的表达量,发现AmalCSP1在雄虫触角、雌虫的腹部和翅表达量较高,推测其主要识别性信息素;此外,AmalCSP4和AmalCSP5在触角和腹部的表达量均高于其它组织,且两者在雌虫触角中的表达量均显著高于雄虫,说明两者可能具有结合普通气味物质和合成性信息素的功能;而AmalCSP8在雌雄成虫中均大量表达,但差异不显著,推测其很有可能在识别寄主植物挥发物中发挥作用。经原核表达,成功构建表达载体,通过诱导重组质粒的表达和SDS-PAGE分析,发现这四种蛋白主要都在上清液中进行表达。利用Ni-NTA His·Bind Resin纯化柱进行蛋白纯化,测得重组蛋白CSP1、CSP4、CSP5、CSP8的质量浓度分别为1.41mg/mL、0.42 mg/mL、0.56 mg/mL和0.50 mg/mL。选取1-NPN为荧光探针,利用荧光竞争结合试验检测四种重组蛋白与苹果小吉丁虫主要寄主植物挥发物(共40种)的结合能力。测得AmalCSP4、AmalCSP5和AmalCSP8的结合常数(Kd)分别为8.199μM、6.954μM和6.924μM。其中CSP5能结合13种气味配体,结合十二醇、十二醛的能力最强,但不结合烷烃类和腈类物质;CSP8仅能结合8种配体,对烷烃类、腈类、醛类均不能有效结合,但对α-蒎烯、α-罗勒烯及双戊烯有着较强的结合能力;而AmalCSP1和AmalCSP4均不能与候选的40种挥发物有效结合,推测它们可能不执行识别寄主植物挥发物的功能,但是否识别苹果小吉丁虫性信息素还有待进一步验证。