高良姜素通过调节肝癌细胞糖代谢过程逆转warburg effect的研究

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[目的]:  肝癌是常见的难治愈的恶性肿瘤,高良姜素是从一种药食两用的植物高良姜中提取的具有抗肿瘤等多种生物活性的天然黄酮类药物。本课题通过高良姜素处理人肝癌细胞HepG2,观察细胞增殖的情况、细胞对氧的吸收量的变化、细胞内乳酸产量的变化和糖代谢过程中相关酶的表达量的变化,讨论高良姜素能否通过调控糖代谢过程逆转肿瘤细胞的warburg效应,为高良姜素应用于肝癌治疗提供理论基础。  [方法]:  1.用MTT方法检测细胞的增殖情况。  2.用高良姜素分别处理人肝癌细胞HepG2细胞3h、6h、12h、24h,通过仪器检测细胞对氧的吸收量的变化。  3.用高良姜素分别处理人肝癌细胞HepG2细胞3h、6h、12h、24h,用westernblot检测细胞内糖代谢过程中的己糖激酶、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸脱氢酶和柠檬酸合酶表达量的变化。  4.用酶联反应法检测高良姜素处理人肝癌细胞HepG2细胞后,细胞中乳酸含量的变化。  [结果]:  1.35μg/mL高良姜素可以抑制人肝癌细胞HepG2的增殖,诱导人肝癌细胞HepG2自噬。  2.35μg/mL高良姜素可以促进细胞对氧的消耗,减少细胞内乳酸的产生。  3.35μg/mL高良姜素处理人肝癌细胞HepG2,在一定时间内可以上调HK,HK、PK和PFK的表达。  4.35μg/mL高良姜素处理人肝癌细胞HepG2,在一定的时间内上调PDH的表达,促进了丙酮酸进入三羧酸循环。  5.35μg/mL高良姜素处理人肝癌细胞HepG2,在一定的时间内可以上调CS的表达,促进三羧酸循环。  [结论]:  高良姜素可以调控肿瘤细胞糖代谢过程中的关键酶(HK,PFK,PK,),高良姜素可以抑制肿瘤细胞的增殖、增加肿瘤细胞对氧的消耗和抑制肿瘤细胞的糖酵解过程,抑制warburg效应。高良姜素在一定的时间内可以上调PDH和CS的表达量,促进了丙酮酸进入三羧酸循环。
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