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纤维素是地球上最丰富,潜力巨大的可再生资源,微生物降解纤维素是纤维素有效利用的一种绿色环保的方法。而绿色木霉（Trichoderma viride）可以产生纤维素酶来降解纤维素。本研究以绿色木霉（T.viride）AS3.3711菌株为实验材料,根据GenBank数据库上登录号为EU518927的T.viride AS3.3711的eg VII基因序列来设计引物,通过DNA和RNA为模板进行PCR,得到的序列经过比对得出内切葡聚糖酶VII基因没有内含子,基因长度782 bp,开放阅读框750 bp,编码249个氨基酸,理论分子量26.8002 KD,理论等电点7.62,信号肽是N端的19个氨基酸,属于糖苷水解酶家族61的一种胞外酶。为高效表达内切葡聚糖酶,将克隆到的eg VII基因连接到表达载体pPIC9K上,获得重组质粒pPIC9K-α1-eg VII,pPIC9K-α2-eg VII和pPIC9K-α3-eg VII。将重组质粒用电转化法转入巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）GS115菌株中,测定内切葡聚糖酶酶活后,发现pPIC9K-05的酶活力最高。甲醇诱导酵母转化子表达,目的蛋白经SDS-PAGE鉴定成功表达,且大小与理论值基本相符。采用实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR）的方法检测毕赤酵母（P.pastoris）转化子经甲醇诱导后的表达量,研究表明:转化子的最大表达量出现在第三天。通过正交实验优化重组P.pastoris转化子的发酵条件,得出:甲醇含量为1%,YNB含量为1.34%,pH为6.0,培养温度为29℃时,产酶量最高,为106.91 U/g。经酶学特性分析,结果显示:温度在40-60℃内酶活较稳定,其中60℃为最佳温度;pH在6.0-8.0范围内有较好的酶活稳定性,其中pH=6.0时最佳;金属阳离子对酶活的影响中,Ag+激活作用较强,Mn2+抑制作用较强;所选五种底物中,MCC效果最好,该内切葡聚糖酶底物饱和时反应速度Vmax=0.5635 mg/（mL·min）,米氏常数Km=0.2623 mg/mL,速度常数Kcat=Vmax/E=0.1702 S-1,相对催化效率Kcat/Km=0.6489 mL/（S·mg）。