论文部分内容阅读
菌株YC-RL2是一株从石油污染土壤中分离的细菌,可以利用环境激素邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)为唯一碳源生长。通过16S r RNA基因分析和Biolog测试,确定YC-RL2为一株登氏菌。它降解过程的最优条件为30°C和pH=8。YC-RL2具有优越的耐盐性,在添加有DEHP的微量元素培养基中可以耐受0~5%的NaCl,但是随着盐浓度的增加DEHP的降解率逐渐下降。该菌株在较宽的pH范围内均表现出良好降解能力(6.0~11.0)。同时,YC-RL2能够耐受高浓度的DEHP(100~800mg/L),且降解率均在94%以上。使用高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS)的方法检测DEHP的代谢中间产物,对降解途径进行了初步的推测。菌株YC-RL2通过邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP),将DEHP被转化为邻苯二甲酸(PA),PA进一步脱羧生成苯甲酸(BA),BA则通过苯甲酸代谢途径被菌株所利用。通过对已有报道的邻苯二甲酸酯降解酶基因设计引物,从菌株YC-RL2中克隆获得了一个编码水解MEHP为PA的酶基因,并对该基因进行了克隆、表达及功能验证。进一步研究发现,该酶能催化多种单烷基邻苯二甲酸酯转化为PA。为了研究YC-RL2在修复污染场地方面的应用潜力,通过模拟原位土壤修复实验研究,发现添加菌株YC-RL2至灭菌土壤DEHP的降解率76%,而在非灭菌土壤中只有44%的降解率。本研究获得了一株耐盐菌可降解多种邻苯二甲酸酯的戈登氏细菌YCRL2,对菌株的降解特性、降解机理及其在邻苯二甲酸酯污染场地的生物修复中的应用潜力进行了探究。