白鲜皮的保肝活性成分研究

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白鲜皮为芸香科植物白鲜(Dictamn dasycarpus Turcz.)的干燥根皮,具有祛风、燥湿、清热、解毒等功效。现代药理学研究表明白鲜皮具有抗氧化,抗病毒,抗细菌,抗炎,抗肿瘤等多种药理作用。本文以植物白鲜的干燥根皮为研究对象,对其化学成分进行了研究,通过MTT法测定白鲜皮中分离出的化合物对人肝癌HepG2细胞的保护作用。本实验用药材白鲜皮采用95%乙醇浸泡提取,将提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取。综合应用多种层析分离技术对二个萃取部分进行分离纯化得到了15个化合物,其中分离得到四个生物碱类化合物,三个柠檬苦素类化合物,三个香豆素类化合物,两个降解柠檬苦素类化合物,一个愈创木类化合物,一个在糖苷类化合物,一个甾醇类化合物。根据理化性质以及综合运用波谱数据鉴定其结构分别为:β-谷甾醇(1),白鲜碱(2),前茵芋碱(3),4,8-二甲氧基-3-(3-甲基-2-丁烯基)-2-喹啉酮(4),柠檬苦素(5),梣酮(6),黄柏酮(7),柠檬苦素地奥酚(8),Fraxinellonone(9),6-甲氧基-7-羟基-香豆素(10),7-isopentenyloxycoumarin(11),11,12,13,-三降愈创木-6烯-4β,10β-二醇(12),5,6,7-三甲氧基香豆素(13),茵芋碱(14),胡萝卜苷(15)。其中化合物4,8-二甲氧基-3-(3-甲基-2-丁烯基)-2-喹啉酮(4),7-isopentenyloxycoumarin(11)和5,6,7-三甲氧基香豆素(13)首次从白鲜皮中得到。体外活性筛选实验中,将实验分为阴性对照组(不给任何化合物),叔丁基过氧化氢(t-BHP)模型组。将每种化合物分别在10μM,20μM,40μM,80μM四个浓度下,分别作用于经t-BHP处理的HepG2细胞。通过MTT法测定细胞活性,结果黄柏酮(Obacunone)具有非常好的肝保护作用,柠檬苦素地奥酚(Evdol)具有微弱的肝保护作用;将这两个化合物分别配制成10μM,20μM,40μM,80μM,以姜黄素做阳性对照,利用MTT法考察化合物对细胞的作用。结果显示:黄柏酮(Obacunone)EC50值为53.23μM。其结果显示黄柏酮(Obacunone)能够对抗由t-BHP引起的HepG2细胞毒性,对HepG2细胞有保护作用。
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