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目的:观察TanⅡA配伍DAPT对UUO大鼠肾纤维化过程中Hes-1蛋白和Snail蛋白的影响,为临床中西医结合防治慢性肾脏病提供实验依据。方法:60只健康SPF级SD大鼠随机分成2组,每组雌雄各半:正常组(n=12)、造模组(n=48)。造模组采用左侧UUO术式制备肾间质纤维化模型,造模后分层随机设计法随机分为UUO组(n=12)、DAPT组(n=12)、TanⅡA组(n=12)和DAPT+TanⅡA配伍组(简称配伍组,n=12),每组雌雄各半。于造模术后第1天开始给药干预处理,每天1次,观察大鼠一般情况,药物干预14天期满行局部麻醉大鼠,双肾称重,左肾组织沿纵轴剖开,1/2肾脏用10%中性甲醛固定行病理染色,另1/2放置-80℃冰箱冻存用于分子检测。HE染色和Masson染色方法了解各组大鼠肾组织的病理变化及胶原纤维沉积情况;免疫组织化学法(IHC-P)从蛋白水平观察大鼠肾组织Snail1蛋白和Slug(即Snail2)蛋白的表达情况;蛋白印迹杂交法(Western Blot,WB)检测大鼠肾组织Hes-1蛋白和Snail1蛋白、Slug蛋白的表达水平;逆转录酶聚合酶链反应法(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)从基因水平检测大鼠肾组织Hes-1mRNA和Snail1mRNA、SlugmRNA的表达情况。结果:1 HE染色结果正常组大鼠肾组织未见病理改变;UUO组大鼠肾组织可见肾小管排列间隙疏松,肾间质发生水肿,大量肾小管腔代偿性肥大或断裂,肾小管上皮细胞出现空泡变性,间质纤维化明显;各给药组病理变化较UUO组均有明显改善(P<0.05)。TanⅡA组HE评分均显著低于DAPT组(P<0.05),配伍组HE评分低于TanⅡA组,但差异无统计学意义(P>0.05)。2 Masson染色结果正常组大鼠肾组织胶原纤维呈细丝状规则分布;UUO组可见肾间质宽度加宽,出现明显的带状或大片状蓝染胶原沉积,胶原染色加深;各给药组肾组织胶原沉积较UUO组均明显减轻(P<0.05)。各给药组间比较,TanⅡA组Masson评分均显著低于DAPT组(P<0.05),配伍组Masson评分低于TanⅡA组,但差异无统计学意义(P>0.05)。3 ELISA检测大鼠血清肾小管功能结果TanⅡA组大鼠血清CYS-C、KIM-1水平较DAPT组显著降低(P<0.05);配伍组大鼠血清CYS-C、KIM-1水平较单一给药组显著降低(P<0.05)。4 ELISA检测大鼠尿液肾功能结果TanⅡA组大鼠24hUPr和尿α1-MG水平较DAPT组均显著降低(P<0.05);配伍组大鼠血清24hUPr水平较单一给药组显著降低(P<0.05)。5 IHC-P检测肾组织蛋白结果DAPT组Snail1蛋白、Slug蛋白的肾组织MOD值较TanⅡA组显著降低(P<0.05);配伍组较单一给药组Snail1蛋白、Slug蛋白MOD显著降低(P<0.05)。6 WB检测肾组织蛋白结果TanⅡA组肾组织Hes-1蛋白相对表达较DAPT组显著降低(P<0.05);DAPT组Snail1蛋白相对表达较TanⅡA组显著降低(P<0.05);配伍组肾组织Hes-1、Slug蛋白相对表达较单一给药组均显著降低(P<0.05)。7 RT-PCR检测肾组织核酸结果TanⅡA组肾组织Hes-1mRNA相对表达较DAPT组显著降低(P<0.05);DAPT组肾组织Snail1mRNA、SlugmRNA相对表达较TanⅡA组显著降低(P<0.05);配伍组较单一给药组肾组织Hes-1mRNA、Snail1mRNA、SlugmRNA相对表达显著降低(P<0.05)。结论:TanⅡA、DAPT及其配伍用药均可在一定程度上改善肾脏大体结构、血清肾功能及肾脏病理改变,对UUO肾间质纤维化大鼠具有一定的保护作用,配伍用药疗效优于单一用药,其机制可能与有效减少UUO大鼠肾组织Notch通路中Hes-1分子和Snail1分子、Slug分子的表达,延缓肾小管上皮-间充质转分化有关。且TanⅡA与DAPT配伍可能起到协同下调Hes-1分子和Snail分子在UUO大鼠肾脏中的表达作用。