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目的:建立背根节慢性压迫模型，观察背根节慢性压迫(chronic compression of dorsal root ganglion，CCD)痛大鼠脊髓Caγ3.3蛋白及其mRNA表达的变化和鞘内注射Caγ3.3反义寡聚核苷酸对CCD大鼠痛阈的影响，探讨Caγ3.3 T型钙通道在慢性神经病理痛中的作用。
方法:第一部分：制备CCD模型，观察大鼠行为学变化。雄性SD大鼠24只，随机分为3组(n=8)，分别是：正常组(Native组)、假手术组(Sham组)和背根节慢性压迫组(CCD组)。分别测定各组大鼠术前2天(基础值)及术后第1、3、5、7、14、21天机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold，MWT)和热缩足反射潜伏期(thermial withdrawal latency，TWL)。
第二部分：检测Caγ3.3蛋白在CCD大鼠脊髓中的表达，雄性SD大鼠18只，随机分为3组，每组6只，即Native组、Sham组、CCD组，分别用免疫印迹(westernblot)与RT-PCR方法检测各组大鼠脊髓腰骶段Caγ3.3蛋白和mRNA表达的变化。
第三部分：鞘内注射Caγ3.3反义寡聚核苷酸对神经病理性痛大鼠脊髓Caγ3.3蛋白表达和痛觉过敏的影响。
1.实验1
鞘内置管成功大鼠，5天后分别行CCD或Sham手术，随机分为4组(n=8)：Sham组、NS组、反义组、错义组。各组均在术后第一天起，每日向鞘内缓慢注射10μl的生理盐水(Sham组和NS组)或Caγ3.3反义寡聚核苷酸(反义组，12.5μ g)或错义寡聚核苷酸(错义组，12.5 μg)，每日2次，连续4 d。分别测定术前1天(基础值)和术后第1～15天每天大鼠右侧后足MWT和TWL。
2.实验2
SD大鼠24只，分组(n=6)和用药情况同实验1。分别在术后第5天(即完成鞘内连续注药4天后)处死大鼠，取大鼠脊髓腰段用于测定Caγ3.3蛋白的表达。
结果:第一部分1.CCD大鼠触诱发痛(MWT)的形成三组间MWT基础值无显著差异。与术前基础值和Sham组比较，CCD组大鼠从术后第1天开始至术后21天内各测定时间点MWT均显著降低(P<0.01)。Native组和Sham组术后各测定时间点MWT与术前基础值比较差异无统计学意义(P>0.05)。
2.CCD大鼠热缩腿潜伏期(TWL)的形成三组间TWL基础值无显著差异。与术前基础值和Sham组比较，CCD组大鼠从术后第1天开始至术后21天内各时间点TWL均显著降低(P<0.01)。Native组和Sham组术后各时间点TWL与术前基础值比较差异无统计学意义(P>0.05)。第二部分1.CCD大鼠脊髓Cav3.3蛋白的表达三组大鼠脊髓均见Caγ3.3蛋白表达。Native组和Sham组间比较差异无统计学意义。CCD组大鼠脊髓Cav3.3蛋白表达较Sham组明显增多，增加了150％(P<0.01)。2.CCD大鼠脊髓Cav3.3 mRNA的表达三组大鼠脊髓均见Cav3.3 mRNA表达。Native组和Sham组间比较差异无统计学意义。CCD组大鼠脊髓Cav3.3 mRNA表达较Sham组明显增多，增加了105％(P<0.01)。
第三部分1.鞘内注射Cav3.3反义寡聚核苷酸对CCD大鼠机械缩足反射阈值(MWT)的影响与Sham组相比，CCD手术三组大鼠术后第1天MWT均显著下降(P<0.01)，表现为明显的触诱发痛。其中反义组大鼠术后第3、4、5、6、7、8天MWT与NS组相比分别增加了57％、179％、266％、158％、204％、59％，差异均有统计学意义(P<0.01，P<0.05)；至术后第9d起，反义组大鼠MWT’恢复至鞘内给药前水平，与NS组比较也无显著差异(P>0.05)。错义组大鼠MWT在各时间点与NS组比较均无显著差异(P>0.05)。2.鞘内注射Cav3.3反义寡聚核苷酸对CCD大鼠热缩足反射潜伏期(TWL)的影响与Sham组相比，CCD三组大鼠术后第1天TWL均显著下降(P<0.01)，表现为明显的热痛觉过敏。其中反义组大鼠术后第4、5、6、7天TWL与NS组相比分别增加了29％、45％、44％、20％，差异均有统计学意义(P<0.01，P<0.05)；至术后第8 d起，反义组大鼠TWL恢复至鞘内给药前水平，与NS组比较也无显著差异(P>0.05)。错义组大鼠TWL在各时间点与NS组比较均无显著差异(P>0.05)。 3.鞘内注射Cav3.3反义寡聚核苷酸对CCD大鼠脊髓Cav3.3蛋白含量的影响Sham组、反义组和错义组Cav3.3蛋白含量分别是NS组的45％、60％、94％。与NS组比较，反义组大鼠蛋白含量减少40％，有显著差异(P<0.01)。错义组大鼠蛋白含量与NS组比较无显著差异(P>0.05)。
结论:1.正常大鼠脊髓可见Cav3.3 T型钙通道蛋白表达。2.背根节慢性压迫致神经病理痛大鼠可见脊髓Cav3.3 T型钙通道蛋白和mRNA表达上调。3.脊髓Cav3.3T型钙通道可能参与神经病理痛的形成。