尿酸氧化酶(Urate oxidase，Uox，Uricase，EC1.7.3.3)能降解尿酸，已广泛用于临床检测和治疗。本实验室于2005年分离到一株产Uox的微杆菌Microbacterium sp.ZZJ4-1菌株，其Uox具有优异的热稳定性。本研究克隆了该酶基因(uox)，构建了重组表达菌株，在优化诱导表达条件后纯化了重组酶，并对其主要性质进行研究。本研究的主要成果如下：　　 1、成功克隆Microbacterium sp.ZZJ4-1的uox。测序表明其开放阅读框为894bp(GenBank登录号为JQ066818)，编码297个氨基酸。该基因与多数已报道的uox无明显同源性，仅与球形节杆菌Arthrobacter globiformis的uox有72％的同源性。将基因插入质粒pET-15b构成pET-15b-uox表达载体，转化至Escherichiacoli BL21(DE3)，成功构建重组表达菌株。　　 2、对影响诱导表达的因子(山梨醇浓度、诱导前生物量、IPTG浓度、诱导时间和诱导温度)进行优化，最终确定条件为：接1％过夜培养的种子菌液于含100 mg/L氨苄青霉素，不含山梨醇的TB培养基中，37℃培养至OD600约为3.5，加IPTG至0.5 mmol/L，22.5℃诱导表达18 h。优化后粗酶液酶活提高30.6倍。　　 3、重组酶经两步纯化后纯度提高14.5倍。SDS-PAGE电泳显示为单一条带，比活可达4.6 U/mg，回收率达47.8％。重组酶由大小约为35 kDa的亚基组成；其最佳反应温度和pH分别为30℃和7.5；在65℃以下和pH8.5-11.0范围内稳定；以尿酸为底物的Km值为0.2 mmol/L；Ag+、Zn2+、Cu2+和SDS均能完全抑制酶活，Tween20、Tween80和Triton X-100对酶活有一定的促进作用。NaN3和金属螯合物1，10-菲罗啉、EDTA轻微抑制酶活。本研究结果表明该重组Uox是目前已报道的热稳定性最好的重组酶。