外周血白细胞BCR/ABL基因产物分析及其临床应用

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慢性髓性白血病(Chronic Myelogenous Leukemia,CML)是一种常见的骨髓干细胞恶性增生性疾病,发病率居各种白血病第三位,仅次于急性粒细胞性白血病(AGL)和急性淋巴细胞性白血病(ALL),约60-70%患者死于慢性急变,绝大多数慢性髓性白血病患者的白细胞中都有细胞学标志物Ph染色体,该染色体为9号染色体与22号染色体发生部分遗传物质易位形成的,同时也形成两种融合基因即ABL/BCR和BCR/ABL,后一种基因可以表达出分子量为210 KDa的微量融合蛋白(P210bcr/abl)。在95%以上的慢性髓性白血病融合蛋白是呈阳性的,检测P210bcr/abl蛋白可以准确和特异地诊断慢性髓性白血病。基于这种理论我们建立了这一研究课题。本研究的目的是建立一种新的适合于我们实验室条件的新技术,检测外周血白细胞内的P210bcr/abl蛋白,为临床提供特异、灵敏、快速诊断慢性髓性白血病的新方法。方法是从外周血中收集白细胞,采用SDS-PAGE分离出P210bcr/abl微量蛋白,用Western blotting将分离的物质转移至NC膜上,与特异的ABL单克隆抗体结合形成抗原抗体结合物,用增强的免疫化学发光法(ECL)对区带进行处理,使其与发光的物质作用产生强信号,对X光片曝光,结果阳性显示清晰印迹。用我们建立的新方法,对68例符合FAB分型的CML患者进行检测,检测结果全部阳性,20例正常献血员全部阴性,与美国M.D.Anderson癌症研究中心检测结果完全一致。本方法定性检测P210bcr/abl ,对诊断CML具有准确、特异、灵敏度高的特点,即使有0.2%Ph阳性细胞也可以被检测到。该方法方便省时,仅用10毫升外周抗凝血,需时2天,便可出结果,且对病人无痛苦。此方法,值得临床推广使用。
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