短瓣金莲花提取物抑菌活性与化学成分相关性研究

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cjcjmalei
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毛茛科金莲花属(Trollius L.)植物金莲花(Trollius chinensis Bunge)为多年生宿根草本植物,其花味苦、性寒、气芳香,具有清热解毒、止腐愈伤等功效,主治刃伤、疮荡多脓、咽喉肿痛等早已被人们所熟知。现代药学研究和临床应用表明,金莲花主要用于上呼吸道感染、咽炎、扁桃体炎和支气管炎,具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化等活性,并在2003年被选为预防严重急性呼吸道综合征(SARS)疾病中的复合处方药物之一。金莲花应用广泛,大多数化合物已被分离和鉴定,其生物活性研究主要集中在黄酮类,同时有机酸类、生物碱类也具有良好的生物活性,但各类化合物在发挥药理作用的个别贡献度尚未阐明。由于金莲花所具有的良好生物活性及广泛应用,使其野生资源匮乏并遭到破坏,因此急需寻找其替代源药材,以拓展金莲花药材来源。短瓣金莲花(Trollius ledebouri chb.)为金莲花同属植物,主要分布于黑龙江省及内蒙古东北部,在苏联西伯利亚东部及远东地区也有分布,资源比较丰富。目前,已有学者对短瓣金莲花进行了初步化学研究,分离得到黄酮类、有机酸类、甾醇类等化合物,并进行了初步活性研究,发现其同样具有抗病毒、抗炎及抗氧化等生物活性。本文在前期大量研究工作的基础上,应用现代科学方法和技术手段,对短瓣金莲花主要进行了以下内容的研究:1、对短瓣金莲花与金莲花性状进行鉴别,并采用薄层色谱、紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法及红外光谱等方法,对短瓣金莲花与金莲花进行了成分对比研究。性状鉴别结果表明短瓣金莲花与金莲花性状具有明显差异,薄层色谱结果显示短瓣金莲花与金莲花化学成分相似;以总黄酮为评价指标,采用紫外分光光度法对不同提取溶剂中总黄酮的含量进行测定,结果表明短瓣金莲花与金莲花总黄酮含量接近;对不同溶剂提取的短瓣金莲花与金莲花的提取物采用HPLC法建立了指纹图谱,比较相同提取条件下短瓣金莲花与金莲花的指纹图谱,指纹图谱显示共有22个共有峰,结果表明,相同提取条件下两者药材成分相似且含量差异不明显;利用红外光谱的宏观指纹特性对短瓣金莲花与金莲花进行分析,结果表明,短瓣金莲花与金莲花主体成分基本相同。以上研究结果为短瓣金莲花药材鉴别及质量控制提供了重要的科学依据。2、采用硅胶及聚酰胺柱色谱、高效液相及半制备型高效液相等现代分析方法和分离手段,对短瓣金莲花进行了化学成分的分离。从中分离出10个单体化合物,通过1H-NMR、13C-NMR、HMBC等波谱分析等手段,结合ESI-MS,最终鉴定了 4个黄酮类化合物的结构,分别为:荭草苷(1)、牡荆苷(2)、4’-甲氧基-牡荆苷(3)和2-(4-methoxy-phenyl)-5,7-hydroxy-8-[6-O-(β-D-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranosyl]-4-1-benzopyran-4-one(4)。其中化合物3、化合物4目前是该属植物中首次发现。3、以头孢氨节作阳性对照,考察了短瓣金莲花及金莲花70%乙醇提取物的不同洗脱部位对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、志贺氏痢疾杆菌的抑菌活性,结果表明,短瓣金莲花与金莲花总提物及其不同洗脱部位对实验菌株均有不同程度抑制作用,且尤以70%总提物抑菌效果最好,其中荭草苷和牡荆苷对大肠杆菌、绿脓杆菌抑菌作用比较明显,对其它实验菌种抑菌效果不明显,推测金莲花抑菌作用可能与其总黄酮类中各单体协同作用有关。以金莲花片为阳性对照,考察短瓣金莲花及金莲花70%乙醇提取物对感染金黄色葡萄球菌小鼠的保护作用,结果表明,短瓣金莲花及金莲花70%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌感染小鼠具有一定的保护作用(P<0.05)。本研究结果为短瓣金莲花可作为金莲花一种新的代用资源提供了科学依据,为进一步深入开发和利用短瓣金莲花资源提供了研究基础。
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