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目的:脂肪因子和炎症的关系近来受到重视,其在关节炎中的作用是个全新话题。我们前期研究中也发现类风湿关节炎(RA)关节液中的脂肪因子脂联素(AD)水平明显高于骨关节炎(OA)。而我们的合作伙伴在强直性脊柱炎的芯片分析中发现另外一个脂肪因子肝素结合性表皮生长因子基因(HB-EGF)明显高表达。本实验旨在研究AD及HB-EGF在RA慢性持续性炎症及骨破坏中的作用,探索其可能存在的意义,为进一步实验奠定基础。方法:(1)用ELISA测定62例RA患者和22例年龄、性别、身体体重指数(BMI)匹配的健康志愿者血清中AD及HB-EGF蛋白水平,同时行Real Time-PCR检测外周血单个核细胞(PBMC)AD及HB-EGF mRNA含量。(2) ELISA测定RA与OA关节液中AD及IL-1β、IL-6、和TNF-α等促炎因子含量,分析AD与其相关性。(3)分别以AD、IL-6、AD协同IL-6刺激人滑膜细胞系MH7A,Real-time PCR检测RANKL mRNA表达情况。(4)构建携带人AD基因的2型重组腺相关病毒(rAAV2-adiponectin),rAAV2-adiponectin体外转染人单核细胞株THP-1,7天后RT-PCR法检测AD的表达,Real-time PCR检测促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达情况。结果:(1) RA重度活动组患者血清中AD及HB-EGF水平(15.8±2.7 ug/ml,745.9±217.0pg/ml)均明显高于中度(13.8±2.6 ug/ml,715.8±189.3pg/ml)、低度活动组(14.9±1.4 ug/ml,575.4±75.1 pg/ml)、缓解组(13.4±2.1 ug/ml, 561.5±80.5 pg/ml)及健康对照组(13.5±2.1 ug/ml, 492.2±59.9 pg/ml)(P<0.05),同时进行相关性分析发现,AD、HB-EGF与DAS28、血沉(ESR)、类风湿因子(RF)或C-反应蛋白(CRP)呈正相关(r =0.3-0.5, P < 0.01)。但各组PBMC均未检测到AD mRNA,PBMC中HB-EGF mRNA虽可以检测到,但各组间无显著性差异。(2) RA关节液中AD、IL-1、IL-6、TNF-α含量较OA高,AD与IL-6正相关( r =0.27, p<0.05 )。(3) AD和IL-6共刺激后,MH7A中RANKL mRNA表达显著增加。(3)成功包装制备出rAAV2-adiponectin。rAAV2-adiponectin成功转染THP-1细胞,但未检测出炎症因子(IL-1、IL-6、TNF-α)改变。结论:AD及HB-EGF可能参与了类风湿关节炎的慢性炎症过程,进一步研究AD及HB-EGF的来源及参与的病理生理过程,可能为深入阐明RA的发病机制,及靶向性治疗RA提供新的思路。