miR-4458在人肝细胞癌侵袭迁移中的作用及机制研究

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目的:研究miR-4458在人肝细胞癌侵袭迁移中的作用及机制。方法:(1)通过qRT-PCR技术检测23对肝细胞癌及配对癌旁组织中miR-4458的表达情况,利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析miR-4458表达水平对肝细胞癌患者总体生存率的影响。(2)调控miR-4458在人肝细胞癌细胞系Hep3B和Huh7中的表达水平。通过划痕实验、Transwell实验验证miR-4458对肝细胞癌细胞侵袭迁移能力的影响,并通过Western blot检测上皮间质转化相关蛋白E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin和Snail的表达变化。(3)使用qRT-PCR以及Western blot等方法检测miR-4458对靶基因及通路分子的影响。结果:(1)相较于配对癌旁组织,miR-4458在肝细胞癌组织中的表达明显下降,低表达miR-4458提示患者生存预期较差。(2)在肝细胞癌细胞中过表达miR-4458可抑制细胞的侵袭、迁移和上皮间质转化,去表达miR-4458可促进肝细胞癌细胞的恶性表型。(3)miR-4458能抑制TGFBR1的表达,并通过抑制TGFBR1来下调TGF-β信号通路关键分子p-Smad2/3的表达水平。结论:miR-4458可通过靶向TGFBR1下调TGF-β信号通路来抑制肝细胞癌细胞的侵袭、迁移和上皮间质转化。本实验阐述了miR-4458新的分子机制,提示miR-4458可能是肝细胞癌治疗的潜在靶点。
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