本研究以体外培养的人骨肉瘤U2OS细胞为实验模型,利用RNA干扰技术下调高迁移率蛋白A2 (HMGA2)表达,分析其对骨肉瘤细胞表型的影响,确定HMGA2在维持骨肉瘤细胞恶性表型中的作用;探讨其作用的分子机制及靶向HMGA2的RNA干扰技术在骨肉瘤治疗中的应用前景。结果:成功地构建了针对HMGA2的,基于DNA的shRNA干扰质粒载体(HMGA2-shRNA);将这一载体稳定转染人骨肉瘤U2OS细胞,明显地下调了其HMGA2的表达水平。细胞表型研究显示,抑制HMGA2表达明显地改变了该细胞的恶性表型;表现为细胞增殖和成集落能力明显下降;自发凋亡率则明显增加;同时细胞迁移速度、侵袭能力及粘附、铺展能力均明显受到抑制;并显著增加了细胞对化疗药物的敏感性。这些结果表明HMGA2在维持骨肉瘤U2OS细胞恶性表型及对化疗药物抗性方面起关键作用。应用实时定量RT-PCR对相关基因表达水平分析发现:下调HMGA2表达使细胞凋亡基因Caspase-3和Caspase-9表达上调,而凋亡抑制基因Bcl-2、Survivin表达水平降低;MMP-2和MMP-9表达降低,TIMP-3表达增高;CDKN1A表达增高,提示HMGA2是通过调控一系列靶基因表达水平来维持骨肉瘤U2OS细胞恶性表型的。本研究还首次发现下调HMGA2使该细胞的SOX2表达水平降低,PTEN表达水平提高。SOX2曾被报道为干细胞的标记物,这一发现提示在U2OS细胞群中有骨肉瘤干细胞样细胞的存在,且与HMGA2表达水平相关。而PTEN则曾被描述为肿瘤抑制基因,进一步证实了HMGA2在维持骨肉瘤细胞恶性表型的决定作用,提示靶向HMGA2的RNA干扰在骨肉瘤治疗中的应用前景。