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背景铜绿假单胞菌肺炎是一种严重的感染性疾病,发病率高、危险因素多。其诊断与准确抗感染治疗常常滞后,而高级别广谱抗生素价格昂贵、副作用明显,给患者及家属增加了痛苦和经济负担。中医学对外感病的治疗有成熟的理论体系和丰富的临床实践。中西医结合临床将是社会和时代的发展趋势,西医标准抗感染治疗联合中医辨证论治处方,以共同发挥作用,改善症状,逆转病情,缩短病程。因此,有必要对铜绿假单胞菌肺炎中医证候特点进行细致研究,并且深入探索中药治疗耐药菌感染的作用机制。目的1调查铜绿假单胞菌肺炎临床确诊病例,记录患者的基本信息、基础病、痰培养结果以及中医四诊资料,归纳铜绿假单胞菌肺炎的中医证候学特点,区分耐药菌株与敏感菌株的证候表现。2以临床常用方剂扶正解毒化瘀方(简称中药)为研究对象,制作含药血清,对多重耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)进行体外抑菌实验,并观察经中药含药血清干预后MDRPA超微结构的改变,探讨扶正解毒化瘀方的抑菌作用机制。方法1收集2016年1月1日至2017年12月31日北京中医药大学东直门医院住院病房确诊的铜绿假单胞菌肺炎(PAP)病例,填写病例调查表。以痰培养+药敏试验结果为准,分为敏感PAP与耐药PAP,总结两组临床表现的差异。2通过试管稀释法、K-B纸片法观察不同等效剂量扶正解毒化瘀方含药血清对MDRPA的体外抑菌作用;用透射电镜观察经中药含药血清干预后MDRPA超微结构的改变。结果1临床部分133例PAP中男性82例,女性51例,耐药PAP 64例,敏感PAP 69例。PAP患者的临床症状以咳嗽、痰白质粘最为常见,中医证型以痰热壅肺证最多见。耐药PAP与敏感PAP均多见于75-84岁年龄段。病原学检出为耐药株者面色偏于晦暗、萎黄,敏感株者偏于较明润。病原学检出耐药株者大便溏稀较多,敏感菌株者大便正常较多。2实验部分2.1试管稀释法在阳性对照管细菌大量繁殖(试管浑浊),阴性对照管无菌生长(试管清亮)的条件下,判断无浑浊的试管中试剂的最小浓度即为该试剂的MIC。(1)扶正解毒化瘀方颗粒剂混悬液对MDRPA的MIC值为0.2g/ml。(2)抗生素亚胺培南西司他丁钠(泰能)对MDRPA的MIC值为16μg/ml。泰能+空白血清组、泰能+0.5倍含药血清组、泰能+1倍含药血清组、泰能+2倍含药血清组MIC 值仍为 16μg/ml。(3)泰能+4倍含药血清组、泰能+8倍含药血清组MIC值为8μg/ml.2.2K-B纸片法本实验中,K-B纸片扩散法结果显示,亚胺培南药敏纸片联合各组不同浓度含药血清,其抑菌环直径之间无显著差异。单纯的含药血清各组和中药提取物组,无明显抑菌环。2.3 MDR-PA电镜显像固定3万倍视野下,细菌分布密度较均匀的区域,统计视野中可见细菌总数,统计损伤细菌数量,计算损伤比率,阳性对照组细菌损伤比率为13%,单纯泰能组细菌损伤比率为50%,泰能联合8倍含药血清组细菌损伤比率为73%。结论临床部分:①铜绿假单胞菌肺炎患者的临床症状以发热、咳嗽、咳痰、痰多白粘等症状为主。其中,以咳嗽、痰白质粘最为多见。年龄多集中在75-84岁,以痰热壅肺证最多见。②75岁以上患者更易发生耐药PAP。耐药PAP患者发热、面色晦暗、痰质粘稠、纳差、便溏、精神萎靡、眠差,与敏感PAP有显著差异,具有统计学意义。实验部分:泰能联合4倍含药血清、泰能联合8倍含药血清均能降低泰能对MDRPA一个梯度的MIC值。8倍含药血清联合泰能之抑菌作用较单纯泰能更加明显,同时,扶正解毒化瘀方含药血清可能减缓或减少了 MDRPA内毒素的释放。